[发明专利]一种甘露聚糖酶突变体及其制备方法和应用在审
申请号: | 202011041012.0 | 申请日: | 2020-09-28 |
公开(公告)号: | CN112391368A | 公开(公告)日: | 2021-02-23 |
发明(设计)人: | 张莉;张蕊;熊海容;邓香连;刘清怡;马牧青 | 申请(专利权)人: | 中南民族大学 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;A23K20/147;A23L29/00;D21C5/00;C11D3/386;C11D7/42;C12R1/84;D06M16/00 |
代理公司: | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人: | 李岩 |
地址: | 430074 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 甘露 聚糖 突变体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种甘露聚糖酶突变体,其特征在于,其为将甘露聚糖酶的氨基酸序列进行突变后得到的蛋白质,所述突变为在甘露聚糖酶的C端添加6个精氨酸、6个赖氨酸或6个天冬氨酸。
2.如权利要求1所述的甘露聚糖酶突变体,其特征在于,所述甘露聚糖酶来自于嗜热好氧细菌,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;编码所述甘露聚糖酶的基因的核苷酸序列如GeneBank Accession No.KJ806637所示。
3.如权利要求1所述的甘露聚糖酶突变体,其特征在于,当所述突变为在甘露聚糖酶的C端添加6个精氨酸时,所述甘露聚糖酶突变体为SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
4.如权利要求1所述的甘露聚糖酶突变体,其特征在于,当所述突变为在甘露聚糖酶的C端添加6个赖氨酸时,所述甘露聚糖酶突变体为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。
5.如权利要求1所述的甘露聚糖酶突变体,其特征在于,当所述突变为在甘露聚糖酶的C端添加6个天冬氨酸时,所述甘露聚糖酶突变体为SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。
6.一种核苷酸序列,其特征在于,所述核苷酸序列编码如权利要求1所述的甘露聚糖酶的突变体,所述核苷酸序列为SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7所示的序列。
7.一种重组质粒,其特征在于,所述重组质粒含有权利要求6所述的核苷酸序列。
8.一种权利要求7所述的重组质粒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将权利要求6所述的核苷酸序列插入到表达载体的多克隆位点处,即得到所述重组质粒;所述表达载体为pPIC9K、pPICZαA、pPICZαB、pPICZαC、pGAPZαA、pGAPZαB或pGAPZαC。
9.一种基因工程菌株的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将权利要求7所述的重组质粒转化至酵母宿主细胞,即得到所述基因工程菌株;所述酵母宿主细胞为Pichiapastoris SMD1168、Pichia pastoris GS115、Pichia pastoris X33或Pichia pastorisKM71。
10.一种基因工程菌株,其特征在于,所述工程菌株是通过权利要求9所述的制备方法制得的。
11.一种权利要求1-5任一项所述的甘露聚糖酶突变体的制备方法,其特征在于,培养权利要求10所述的基因工程菌株,收集上清后分离纯化即得到所述甘露聚糖酶的突变体。
12.一种权利要求1-5任一项所述的甘露聚糖酶突变体在饲料、纺织、造纸、洗涤或食品中的应用。
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