[发明专利]新型冠状病毒实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒及其专用引物和探针

权利要求书

1.一种新型冠状病毒实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒，其特征在于，包括：

(1)核酸提取液：其包含含有特异性捕获探针A的固相支持物和第一引物，其中所述捕获探针A用于捕获检测序列，所述第一引物用于与靶标序列特异性结合；

(2)检测液a：其包含第二引物，所述第二引物与所述第一引物配合，用于扩增靶标序列；

(3)检测液b：其包含第一引物和靶标检测探针，其中所述靶标检测探针与所述靶标的扩增产物RNA拷贝特异性结合；

(4)SAT酶液：其包含至少一种RNA聚合酶和M-MLV反转录酶；

所述检测序列选自新型冠状病毒ORF1ab基因(简称O基因)中一段高度保守且与其他类型冠状病毒有较大差异的序列(优选SEQ ID NO:1)，和/或新型冠状病毒N基因中一段高度保守且与其他类型冠状病毒有较大差异的序列(优选SEQ ID NO:9)。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述检测序列选自O基因，所述第一引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述第二引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示，所述靶标检测探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；

优选地，所述特异性捕获探针A的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述检测序列选自N基因，所述第一引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:11所示，所述第二引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:12所示，所述靶标检测探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示；

优选地，所述特异性捕获探针A的核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述检测序列选自O基因和N基因，所述第一引物包括引物A和引物B，其中所述引物A的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述引物B的核苷酸序列如SEQ ID NO:11所示；所述第二引物包括引物C和引物D，其中所述引物C的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示，所述引物D的核苷酸序列如SEQ ID NO:12所示；所述靶标检测探针包括第一探针和第二探针，其中所述第一探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示，所述第二探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示；

优选地，所述特异性捕获探针A包括第一特异性捕获探针和第二特异性捕获探针，其中所述第一捕获探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述第二特异性捕获探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：

(5)洗涤液：其含有NaCl和SDS；和/或

(6)矿物油；和/或

(7)阳性对照：新型冠状病毒ORF1ab基因和/或N基因转录RNA的稀释物；和/或

(8)阴性对照：不含有新型冠状病毒核酸的体系。