[发明专利]一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法

说明书

本发明公开了一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，属于药物分析技术领域。本发明的方法采用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，采用流动相A和流动相B进行反相高效液相色谱梯度洗脱；其中，流动相A为盐浓度为10～30mmol/L、用pH调节剂调至pH为2.5～4.0的磷酸盐缓冲液，流动相B为甲醇或乙腈。本发明的方法简单高效、易操作、通用性强、灵敏度高，对茚达特罗和格隆溴铵的测定均具有较低的定量限，快捷高效，能够很好地满足研发和生产的需求。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法。

背景技术

马来酸茚达特罗是一种长效β2-肾上腺素受体激动剂(LABA)，可以激活部分细胞内腺苷环化酶，该酶能够催化三磷酸腺苷(ATP)转化为环-3’,5’-一磷酸腺苷(环一磷酸腺苷)。环磷酸腺苷(cAMP)水平升高引起支气管平滑肌松弛，可以舒张气道、减少肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒和介质的释放、降低微血管的通透性、增加气道上皮纤毛的摆动，在肺内局部发挥支气管扩张剂的作用，缓解慢性阻塞性肺病的症状。格隆溴铵是一种抗胆碱能药物，是长效乙酰胆碱受体拮抗剂(LAMA)，对人体乙酰胆碱能M3受体的选择性高于M2受体4倍，可特异性结合并抑制支气管平滑肌分布的M3型乙酰胆碱受体而扩张气道。

马来酸茚达特罗格隆溴铵复方药物由诺华开发，商品名为中文名“杰润”，于2019年4月11日在中国上市，剂型为胶囊型吸入粉雾剂，每粒含马来酸茚达特罗110μg(以C₂₄H₂₈N₂O₃计)和格隆溴铵50μg(以C₁₉H₂₈NO₃计)。用于包括慢性支气管炎和肺气肿等成人慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的维持性支气管扩张治疗以缓解症状。

在药品研究和开发过程中，有效物质的含量和杂质的准确测定和分析是保证药品质量的重要条件。该复方药中，茚达特罗和格隆铵的有效成分是μg级别的，且在粉雾剂的研究中，需要对其微细粒子分布进行重点研究，用设备进行体外分析时，各部位的沉积量更是少之又少，因此在含量分析中，要求分析方法有足够的灵敏度和准确度。现有技术对茚达特罗和格隆溴铵含量测定的报道(Rapid simultaneous determination of indacaterolmaleate and glycopyrronium bromide in inhaler capsules using a validatedstability-indicating monolithic LC method，Zayed and Belal Chemistry CentralJournal，2017，11:36)，需要用超高效液相色谱仪，利用内标物替诺昔康进行定量，且灵敏度分别为0.16μg/mL和0.34μg/mL，操作复杂，对操作人员的要求高，定量限不能满足研发需求。另有文献(RP-HPLC-DAD method for the simultaneous quantification ofquantification of indacaterol and glycopyrronium in their pharmaceuticalformulation，World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences，2018，Volume7,Issue 3,166-176)测得的定量限分别为0.5μg/mL和0.1μg/mL，不能满足微细粒子分布测试的需要。还有文献(HPLC Determination of Indacaterol Maleate in PharmaceuticalPreparations Adopting Ultraviolet and Fluorescence Detection，InternationalJournal of Pharma Sciences and Research，2015，Volume 6，No 11)是采用两种检测器-紫外检测器和荧光检测器进行测定，操作复杂，设备要求高，检测成本高。