[发明专利]一种用于线粒体或溶酶体质量差异分析的系统及方法

说明书

本发明公开了一种用于线粒体或溶酶体质量差异分析的系统及方法，其中涉及一种用于线粒体或溶酶体质量差异分析的系统，包括：检测模块，用于通过体外检测试剂盒对外周血进行检测，得到线粒体或溶酶体的原始数据；处理模块，用于基于降维算法和仪器校正工具对得到的线粒体或溶酶体的原始数据进行处理，得到与线粒体或溶酶体相对应的数值；比较模块，用于将所述得到的数值与预设阈值进行比较，得到线粒体或溶酶体质量差异分析结果。本发明以减少背景噪声的检测过程，下降了该检测方法的使用成本和操作复杂程度。

技术领域

本发明涉及差异分析技术领域，尤其涉及一种用于线粒体或溶酶体质量差异分析的系统及方法。

背景技术

线粒体、溶酶体作为亚细胞器结构，其质量的检测手段非常有限，由于亚细胞器大多为动态发展过程，时刻处于分裂和融合的过程中，一般很难去检测其功能的变化，通常线粒体的质量与功能直接相关，如文献：“Federico A， Cardaioli E， Da Pozzo P，Formichi P， Gallus GN， Radi E. Mitochondria， oxidative stress andneurodegeneration. J Neurol Sci. 2012;322(1-2):254-262. doi:10.1016/j.jns.2012.05.030”、“Youle RJ， Bliek AM van der. Mitochondrial Fission，Fusion， and Stress. Science (New York， NY). 2012;337(6098):1062. doi:10.1126/science.1219855”。

常规检测线粒体、溶酶体的方法主要是使用小分子探针，通过线粒体和溶酶体的自身细胞器特点，富集在细胞器周围或者内膜中，小分子探针中嵌入荧光素基团，通过荧光显微镜进行主观观察，如文献“Spontaneous Changes in Mitochondrial MembranePotential in Culture Neurons. Published online 2001.”、“Chazotte B. Labelingmitochondria with Mito-Tracker dyes. Cold Spring Harb Protoc. 2011;2011(8):990-992. doi:10.1101/pdb.prot5648”。

荧光显微镜中无法直接数量化线粒体和溶酶体的质量变化，仅能通过细胞中荧光标记的线粒体亮度、大小进行主观判断。随着流式细胞技术的进步，目前也有通过流式细胞仪进行线粒体和溶酶体的检测方案，该方案中，需要对检测的靶细胞的线粒体/溶酶体进行小分子的荧光探针的标记，同时还需要使用去极化的化学物质将靶细胞的线粒体和溶酶体处理，以获得背景信号，再用测试结果减去背景结果，以获得质量变化值。如文献“Wei C-W，Zhou T-A， Dzhagalov IL， Hsu C-L. Multicolor Flow Cytometry-basedQuantification of Mitochondria and Lysosomes in T Cells. JoVE. 2019;(143):58844. doi:10.3791/58844”、“Clutton G， Mollan K， Hudgens M， Goonetilleke N. AReproducible， Objective Method Using MitoTracker® Fluorescent Dyes to AssessMitochondrial Mass in T Cells by Flow Cytometry. Cytometry. 2019;95(4):450-456. doi:10.1002/cyto.a.23705”、“Xiao B， Deng X， Zhou W， Tan E-K. FlowCytometry-Based Assessment of Mitophagy Using MitoTracker. Front CellNeurosci. 2016;10. doi:10.3389/fncel.2016.00076”。