[发明专利]多重检测呼吸道病毒核酸的方法及试剂盒有效
| 申请号: | 202010980496.9 | 申请日: | 2020-09-17 | 
| 公开(公告)号: | CN112063756B | 公开(公告)日: | 2022-09-30 | 
| 发明(设计)人: | 蒋析文;黄桃生;李欣钰;黄志文;林卫萍 | 申请(专利权)人: | 广州达安基因股份有限公司 | 
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 | 
| 代理公司: | 上海助之鑫知识产权代理有限公司 31328 | 代理人: | 陈详 | 
| 地址: | 510665 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 多重 检测 呼吸道 病毒 核酸 方法 试剂盒 | ||
1.一种多重检测呼吸道病毒核酸的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括引物对集和探针集;
其中,所述引物对集由第一引物对组、第二引物对组、第三引物对组、第四引物对组、和第五引物对组组成,其中:
所述第一引物对组包括如SEQ ID NO.5所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.6所示的反向引物;
所述第二引物对组包括如SEQ ID NO.7所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.8所示的反向引物;
所述第三引物对组包括如SEQ ID NO.1所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.2所示的反向引物;
所述第四引物对组包括如SEQ ID NO.3所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.4所示的反向引物;
所述第五引物对组包括如SEQ ID NO.9所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.10所示的反向引物;
所述探针集由检测探针SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、和SEQ ID NO.15组成。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括第一容器,所述第一容器内包含引物探针混合液,所述引物探针混合液中包含多种引物和多种探针,其中所述引物为多核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ IDNO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10所示的引物;所述探针为分别具有SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、和SEQ ID NO:14、SEQID NO.15所示的多核苷酸序列的探针。
3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括第二容器,所述第二容器内包含热启动Taq酶、逆转录酶、和dNTPS。
4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括第三容器,所述第三容器内包含阳性对照。
5.如权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括第四容器,所述第四容器内包含阴性对照。
6.一种非诊断目的的检测呼吸道病毒核酸的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
(1)提供待检测对象的核酸样本;
(2)制备PCR反应体系并进行荧光定量PCR检测:
其中,所述PCR反应体系包括:步骤(1)提供的所述核酸样本和引物探针混合液,所述引物探针混合液中包含多种引物和多种探针,其中所述引物为多核苷酸序列分别如SEQ IDNO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、和SEQ ID NO:10所示的引物;所述探针为分别具有SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、和SEQ ID NO:15所示的多核苷酸序列的探针。
7.引物对集、和探针集的用途,用于制备PCR检测试剂盒,所述PCR检测试剂盒用于检测呼吸道病毒核酸;
其中,所述引物对集由第一引物对组、第二引物对组、第三引物对组、第四引物对组、和第五引物对组组成,其中:
所述第一引物对组包括如SEQ ID NO.5所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.6所示的反向引物;
所述第二引物对组包括如SEQ ID NO.7所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.8所示的反向引物;
所述第三引物对组包括如SEQ ID NO.1所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.2所示的反向引物;
所述第四引物对组包括如SEQ ID NO.3所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.4所示的反向引物;
所述第五引物对组包括如SEQ ID NO.9所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.10所示的反向引物;
所述探针集由检测探针SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、和SEQ ID NO.15组成。
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