[发明专利]抗人CTLA4单克隆抗体及其应用

说明书

本发明提供了一种鼠抗人CTLA‑4单克隆抗体或其抗原结合片段，能够高亲和力的结合人CTLA‑4，并且其能够有效的阻断CTLA4与配体B7家族分子的相互作用，其阻断活性比已经上市的药物Ipilimumab(伊匹单抗)更强。本发明的单克隆抗体或其抗原结合片段能够激活T细胞，促进IFN‑γ的分泌，从而提高免疫应该水平。本发明提供具有特异性可变区序列的特异性抗体以及包含此类抗体的组合物，用于癌症免疫治疗，尤其是与其他免疫治疗剂相比，可以降低免疫相关不良事件(immune‑related adverse events，irAEs)的发生。

发明领域

本发明属于肿瘤疗法和分子免疫学领域。本发明涉及抗CTLA4抗体，药物组合物及其用途。

发明背景

适应性免疫应答的关键环节是T细胞特异性的识别抗原并被激活。完全激活T细胞需要两个信号,第一个信号是T细胞表面的TCR/CD3与抗原递呈细胞表面(APC)的多肽-MHC复合物的结合，这是一种抗原特异性信号。第二个信号，也称为共刺激信号，是T细胞和APC表面的共刺激分子对的作用(Lenschow等，(1996)Annu Rev Immunol.14：233)。T 细胞在这两个信号作用后,通过PLC-PKC、IP3及PI-3K-Ras-MAPK等信号途径,激活各种转录因子,诱导促进T细胞生长和分化的细胞因子(IL-2等)及相应的受体表达。T细胞和APC 表面可同时表达多种共刺激分子对及共抑制分子对,它们统称为共信号分子。共刺激分子介导T细胞激活和增殖，共抑制分子则发挥免疫负调节作用，维持机体免疫自稳。已识别特异性抗原的T细胞如果没有第二信号的激活,那么T细胞可能出现失能(anergy)或者克隆丢失(clonaldeletion)。

由APC(例如树突状细胞(DC),激活的单核细胞和B细胞)表达的B7-1(也称为B7，B7.1或CD80)和B7-2(也称为B7.2或CD86)是激活和维持T细胞免疫应答的重要的共刺激分子。在炎性状态下，APC会诱导表达B7-1和B7-2。B7-1/B7-2和T细胞的共刺激分子结合后给初始T细胞(T-cell)的活化提供了第二信号。静止APC表面B7-2以低水平组成型表达，TCR/MHC(第一信号)作用后，其表达迅速上调，24小时后达到高峰(Freeman 等，(1993)Science 262：823-827)。而B7-1在静息细胞上表达水平非常低，但是在细胞激活后缓慢的诱导表达，其表达水平在刺激几天后才达高峰(Hathcock等，(1994)J Exp Med.180：631-640)。这些差异表明二者可能在免疫应答的不同阶段发挥作用。B7-2在启动免疫应答中起主要作用，而B7-1由于在免疫应答过程中被缓慢上调，很可能在维持细胞免疫应答中起重要作用。

T细胞上的CD28分子是B7-1/B7-2的配体之一，属于组成型表达的免疫球蛋白家族，在激活后表达上调。当CD28与APC上的配体B7-1/B7-2结合后，共刺激信号通过CD28 传导，诱导T细胞增殖并分泌白介素2(IL-2)和抗凋亡因子等。T细胞活化需要双信号，CD28与B7-1/B7-2结合提供了关键的第二信号。只有TCR/MHC第一信号并不能诱导T细胞的免疫应答，缺乏CD28提供的第二信号，T细胞将进入无反应状态或免疫耐受，甚至引起细胞凋亡。因此，选择性的激活B7-CD28途径具有控制T细胞命运的巨大治疗潜力。