[发明专利]汉逊酵母重组COVID-19病毒样包膜颗粒疫苗细胞株

说明书

本发明为汉逊酵母重组COVID‑19病毒样包膜颗粒疫苗细胞株，该细胞株中包括汉逊酵母重组COVID‑19病毒样包膜颗粒S刺突蛋白的优选码DNA序列如SEQ ID NO:1所示；汉逊酵母重组COVID‑19病毒样包膜颗粒M膜蛋白的优选码DNA序列如SEQ ID NO:2所示；汉逊酵母重组COVID‑19病毒样包膜颗粒E包膜蛋白的优选码DNA序列如SEQ ID NO:3所示。该细胞株具有更高的免疫保护水平和更高的人群免疫覆盖率、绿色经济、人体更安全。

技术领域

本发明涉及免疫治疗技术领域，具体为汉逊酵母重组COVID-19病毒样包膜颗粒疫苗细 胞株。

背景技术

SARS-CoV-2病毒共有4种结构蛋白：S刺突蛋白、E包膜蛋白、M膜蛋白和N核蛋白，还包含16种非结构蛋白；其氨基酸总数的80％，SARS-CoV-2病毒基因组的核苷 酸A、T含量≥50％。

Nature Reviews Immunology 2020July的美国贝勒医学院科学家报道：以一种安全的方式 获得高水平的抗ARS-CoV-2的中和抗体(NAb)可能是有效疫苗的关键。科学家们正在竞 相开发安全有效的疫苗来预防COVID-19，至少有十几种候选疫苗已经在临床上或很快进入 临床研发阶段。来自动物试验和人体试验的新研究已经表明了一些潜在的趋势，重点是达到 高水平的中和抗体。例如，疫苗诱导的假病毒中和抗体滴度与猕猴的保护效果相关。对冠状 病毒尖峰蛋白的中和抗体最终可能成为一种免疫相关物。评估了化学灭活病毒疫苗PiCoVacc (天然的COVID-19包膜颗粒疫苗)在猕猴(Macaca mulatta)中的免疫原性和保护效果，这 是一种非人灵长类物种，显示了由SARS-CoV-2感染引起的COVID-19样疾病。在第0、7 和14天(n＝4)，分别用中剂量(3μg/剂)或高剂量(6μg/剂)的PiCoVacc对猕猴进行三 次肌内免疫。所有接受PiCoVacc的猕猴在SARS-CoV-2攻击后的咽或肺中都没有可检测到 的病毒，诱导小鼠中和抗体滴度达数千，猕猴中和抗体滴度达400。Ad5载体COVID-19疫 苗(一种亚单位疫苗)在健康成年人中是可耐受和免疫原性的。在所有剂量浓度(5×10¹⁰、 1×10¹¹和1.5×10¹¹病毒颗粒/人)下，一剂疫苗在大多数情况下均可诱导特异性抗体和T细 胞反应参与者。快速第14天观察到特异性T细胞反应，针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2 的特异性体液反应在疫苗接种后第14天达到高峰28天。虽然我们发现高剂量疫苗比中剂量 和低剂量疫苗更具免疫原性，但它也具有较高的反应原性。高剂量组的一些受试者出现严重 发热、疲劳、呼吸困难、肌肉疼痛和关节疼痛。抗SARS-CoV-2的中和抗体在第0天全部阴 性.在第14天中度增加，在接种后28天达到高峰。高剂量组中和抗体的几何平均滴度为34.0 (95％可信区间22.6–50.1)，明显高于中剂量组的16.2(10.4–25.2)和低剂量组的14.5(9.6 –21.8)。特别是参与者中已有的Ad5中和抗体滴度为低或阴性(≤1:200)或高(1:200)； 导致不能接种第二剂Ad5载体COVID-19疫苗的特异性记忆B的加强剂。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明拟解决的技术问题是提供一种汉逊酵母重组ARS-CoV-2 病毒样包膜颗粒疫苗细胞株。该细胞株具有更高的免疫保护水平和更高的人群免疫覆盖率、 绿色经济、人体更安全。

本发明解决所述技术问题采用的技术方案是：提供一种汉逊酵母重组COVID-19病毒样 包膜颗粒疫苗细胞株，其特征在于，该细胞株中包括汉逊酵母重组COVID-19病毒样包膜颗 粒S刺突蛋白的优选码DNA序列如SEQ ID NO:1所示；汉逊酵母重组COVID-19病毒样包膜颗粒M膜蛋白的优选码DNA序列如SEQ ID NO:2所示；汉逊酵母重组COVID-19病毒样 包膜颗粒E包膜蛋白的优选码DNA序列如SEQ ID NO:3所示。

汉逊酵母为HU-11多形汉逊酵母，HU-11多形汉逊酵母的乳清酸苷-5-磷酸脱羧酶基因被 破坏的DNA序列如SEQ ID NO：4所示。