[发明专利]基于氮掺杂石墨烯量子点荧光探针的鲜味氨基酸检测方法及探针

说明书

本发明公开了一种基于氮掺杂石墨烯量子点荧光探针的鲜味氨基酸检测方法，其包括以下步骤：步骤一，制备氮掺杂石墨烯量子点，按照7:6的比例取水合柠檬酸和尿素置于去离子水中，制得浓度为10‑50mg/mL的混合溶液，所述混合溶液再反应釜中，160℃水热反应4h；步骤二，构建氮掺杂石墨烯量子点荧光探针；步骤三，测定鲜味氨基酸的含量，将待测汤煲样品以水溶液形式与1mL浓度为100μg/mL的N‑GQDs溶液混合，测量其荧光发射光谱读取荧光值，其中，激发波长为355nm。本发明还提供了一种氮掺杂石墨烯量子点荧光探针。本发明具有操作简单快捷，结果准确的优点。

技术领域

本发明涉及一种氨基酸检测方法。更具体地说，本发明涉及一种基于氮掺杂石墨烯量子点荧光探针的鲜味氨基酸检测方法及氮掺杂石墨烯量子点荧光探针。

背景技术

鲜味是汤煲类产品最重要的品质指标之一，主要呈鲜物质是氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、小分子肽类等。鲜味氨基酸(谷氨酸、天冬氨酸)是汤煲鲜味的主要来源，快速准确地检测汤煲中鲜味氨基酸，是汤煲品质控制非常重要的一环。

目前氨基酸常见检测方法是氨基酸分析仪和高效液相色谱，但是这两种方法存在预处理过程复杂，需要专门的检测人员，同时需要消耗大量有机溶剂等问题，因此，迫切需要开发一种检测成本低、操作简单、灵敏度高的谷氨酸和天冬氨酸定量检测方法，为快速鲜味评价提供依据。

随着碳基纳米材料的不断发展，石墨烯量子点(GQDs)因其易于控制、特殊的荧光发射特征等内在优势而发展迅速。氮原子掺杂能够调节GQDs的带隙并在导带附近产生大量局部能级，实现量子产率、荧光强度的显著提高，因此开发一种简易、易于控制的方法且具有高性能的N-GQDs对于实际应用而言具有非常重要的意义。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种基于氮掺杂石墨烯量子点荧光探针的鲜味氨基酸检测方法，其能够快速简便地制备线性范围广、灵敏度高、特异性好的氮掺杂石墨烯量子点(N-GQDs)探针，快速精确的对汤煲中鲜味氨基酸进行定量检测。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种基于氮掺杂石墨烯量子点荧光探针的鲜味氨基酸检测方法，其包括以下步骤：

步骤一，制备氮掺杂石墨烯量子点，按照7:6的比例取水合柠檬酸和尿素置于去离子水中，制得浓度为10-50mg/mL的混合溶液，所述混合溶液再反应釜中，160℃水热反应4h后，经冷却、透析纯化以及冷冻干燥后即可；

步骤二，构建氮掺杂石墨烯量子点荧光探针，取氮掺杂石墨烯量子点粉末溶于水制得浓度为100μg/mL的N-GQDs(氮掺杂石墨烯量子点)溶液；

步骤三，测定鲜味氨基酸的含量，将待测汤煲样品以水溶液形式与1mL浓度为100μg/mL的N-GQDs溶液混合，测量其荧光发射光谱读取荧光值，其中，激发波长为355nm。

优选的是，所述步骤三还包括建立谷氨酸和天冬氨酸标准曲线，具体步骤为：室温下，将1mL 100μg/mL的N-GQDs溶液分别与1mL预定浓度梯度的谷氨酸或天冬氨酸溶液，在355nm激发下测量荧光发射光谱，读取梯度荧光值，建立浓度与梯度荧光值变化的标准曲线特异性检测；其中，所述预定浓度梯度为5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL以及400μg/mL。

优选的是，所述步骤三还包括：将所得荧光值代入步骤四中所得标准曲线，计算出样品中谷氨酸含量和天冬氨酸含量。

优选的是，所述步骤二中构建氮掺杂石墨烯量子点荧光探针的具体步骤为：室温下，取1mL 100μg/mL的N-GQDs溶液和1mL氨基酸溶液以及缓冲液在10mL的离心管混合，室温孵育40min后，将混合溶液转移到一个200μL的石英比色皿中即得。