[发明专利]一种复合免疫增强剂

说明书

一种复合免疫增强剂，以牛结核分枝杆菌(BCG)为基础核心材料，复配具有协同增强免疫作用的辅料——真菌多糖，制备而成的一种免疫佐剂。制备方法为；对发酵培养后的BCG菌体，进行分离、提取、纯化、精制，获得具有可刺激机体非特异性免疫反应的菌体蛋白，再复配加入可溶性真菌多糖，完成复合免疫增强剂的制备。复合免疫增强剂自身为水溶性、具有非特异性免疫刺激功能、对机体组织无毒副作用、无刺激反应、可有效大幅提高免疫接种中，特异性目的抗原的致敏免疫原作用，提高机体对目的抗原的免疫应答反应。该新型复合免疫增强剂可广泛用于动物的抗原免疫、抗体制备、动物疫苗增强，以及人用疫苗的研发使用，具有良好的经济效益和社会效益。

技术领域

本发明属于生物医药制备技术领域。

背景技术

可提高机体免疫增强作用的制剂通常称为“佐剂”，是一种已被长期广泛使用的免疫学试剂，用于试验研究、抗体制备、以及疫苗的作用增强等。其作用原理首先是具有良好的非特异性刺激机体，产生高效率免疫应答反应。辅助特异性致敏原(特异抗原)引发和提高机体对特异抗原的特异性免疫反应。如B细胞反应的特异性抗体的生成，或是T细胞产生的特异性免疫细胞因子。二是能够刺激机体较长时间，对特异性目标抗原保持持续的免疫反应应答。

免疫增强剂(佐剂)已被长期和广泛的应用于免疫学实践中，是公认的传统、经典的免疫学常规试剂。在传统的免疫增强剂(佐剂)中，均是以灭活的BCG菌体为非特异性免疫刺激源，加入乳化的油脂类材料，制备成具有诱发机体非特异性免疫反应，增强对目标抗原的刺激活性，提高特异性抗血清和抗体效价的形成，以及细胞免疫因子的生成。随着试验材料的改进提高，原始使用“羊毛脂+石蜡油乳化”的油脂类载体，被葡聚糖等高分子物质所替代，同样取得了满意的结果和认同。目前知名试剂商Sigma公司的”完全免疫佐剂“就是这类产品。

上述免疫增强剂(佐剂)产品虽显示了在非特异性免疫刺激反应中的作用，但在使用过程中也同时存在一个很难克服的缺陷。因产品中使用了灭活的BCG菌体，具有明显刺激机体的毒副作用。尤其是皮肤、肌肉注射时显现出强烈的红斑、肿块，有些甚至出现溃疡。因此也制约了该类产品的使用范围(特别是在作为疫苗增强作用使用时，因其过强的毒副作用反应，而放弃使用。)。

因此筛选、制备具有同样较强的能够刺激机体非特异性免疫反应，同时又无刺激、无毒副作用，具有良好生物安全性的新型免疫增强剂是一个很好的产品研发思路和课题。

发明内容

本发明目的是解决现有免疫佐剂添加BCG后副作用大的问题，提供一种新的复合免疫增强剂。本发明以精制、纯化的BCG菌体蛋白(BCG菌株做为非特异性免疫刺激的标志菌株，是其它菌属、种菌株很难与其相比和替代的)为新型免疫增强剂的非特异免疫刺激蛋白。加入具有持续、协同增强免疫作用的真菌多糖，制备一种新型的复合免疫增强剂。该新型复合免疫增强剂可广泛用于动物的抗原免疫、抗体制备、动物疫苗增强，以及人用疫苗，可产生良好的经济效益和社会效益。

本发明的技术方案

一种复合免疫增强剂，以分离纯化后的可溶性BCG菌体蛋白为主体加入协同增强免疫作用的辅助材料(分离、纯化的大分子真菌多糖成分)而制成。可溶性BCG菌体蛋白与真菌多糖的复配可选用任何比例进行。

所述BCG菌体蛋白的制作过程是，以发酵培养的牛结核分枝杆菌(BCG)为制备复合免疫增强剂用菌体蛋白的基础菌株，发酵培养的BCG菌体，经超声破碎、超速离心，去除碎片残渣，获得可溶性BCG菌体蛋白，冷冻干燥保存。所获得的可溶性BCG菌体蛋白，经SDS-PAGE检测主要为：100KD、70KD、50KD、35KD和30KD蛋白混合体。

所述真菌多糖为香菇多糖、银耳多糖或虫草多糖等中的一种或多种复配(添加比例可以不同也可以相同)而成，具有免疫刺激作用强，毒副作用小、皮肤刺激反应小的特点。