[发明专利]一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法

说明书

本公开公开了一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法，包括以下步骤：(1)斜面培养基和保藏液的制备；2)斜面菌种的制备：将金针菇菌种接种到步骤(1)制备的斜面培养基中；3)保藏菌种的制备：取步骤(2)所得斜面培养基基质菌丝块放于步骤(1)保藏液中封口；4)保藏：将所述步骤(3)的金针菇斜面培养基放置于0‑6℃恒温血液培养箱保藏；步骤(1)中，斜面培养基原料包括：马铃薯80–400g/L，葡萄糖8–40g/L，琼脂15–25g/L，大豆蛋白5–15g/L，牛肉膏浸出物5–12g/L，硫酸镁0.2–1.2g/L，磷酸二氢钾0.5–2g/L，麦芽粉2–6g/L。本公开选取生长健壮的基质菌丝置于安瓿瓶内，注入生理盐水保藏液低温保藏，能长时间保持菌种原有优良性状。

技术领域

本公开涉及一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法。

背景技术

本部分的陈述仅仅是提供了与本公开相关的背景技术信息，不必然构成在先技术。

目前金针菇菌种的保藏办法包括液氮保存法，麦粒保藏法，斜面生理盐水保藏法，斜面低温保藏法，麸皮保藏法，连续传代保存法等；

液氮保藏设备要求严格，成本高，活化后原有性状保留差；斜面低温保藏法周期短，斜面培养基易干燥，菌丝易发黄老化；麦粒和麸皮保藏法容易长出子实体和粉孢子；斜面生理盐水保藏法容易出现部分斜面露出水面，干燥老化；连续传代保存法，传递代数过多，容易因操作手法导致退化。

发明内容

本公开为了解决上述问题，提出了一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法。

本公开的目的是提供一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法，为克服以往菌种保藏方法的不足，实现金针菇菌种更好的保藏和便于生产利用，本发明的目的在于提供一种新的斜面菌种的保藏方法，降低保藏成本投入，增长保藏时间，避免产生粉孢子和干燥老化，能长时间保持菌种的遗传稳定性。

为了实现上述目的，本公开采用如下技术方案：

一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法，包括以下步骤：

(1)斜面培养基和保藏液的制备；

(2)斜面菌种的制备：将金针菇菌种接种到步骤(1)制备的斜面培养基中；

(3)保藏菌种的制备：取步骤(2)所得斜面培养基基质菌丝块放于步骤 (1)保藏液中封口；

(4)保藏：将所述步骤(3)的金针菇斜面培养基放置于0-6℃恒温血液培养箱保藏；

所述步骤(1)中，斜面培养基原料包括：马铃薯80–400g/L，葡萄糖8– 40g/L，琼脂15–25g/L，大豆蛋白5–15g/L，牛肉膏浸出物5–12g/L，硫酸镁 0.2–1.2g/L，磷酸二氢钾0.5–2g/L，麦芽粉2–6g/L；

所述步骤(1)中斜面培养基制作步骤如下：取新鲜无芽的马铃薯80-400g 加入1升的水煮熟，过滤，得到滤液，向滤液内加入葡萄糖8-40g、琼脂15-25g、大豆蛋白5-15g、牛肉膏浸出物5–12g、硫酸镁0.2–1.2g、磷酸二氢钾0.5– 2g、麦芽粉2–6g加热至琼脂全部溶解，补水定容至1L，将获得的溶液置于三角瓶内，塞上透气塞，于119-135℃灭菌30-60min，灭菌完成后待溶液降温至 50-80℃时倒入20mm*200mm试管内摆成斜面，冷却至完全凝固后得到斜面培养基；

优选的，所述步骤(1)中，斜面培养基制作步骤如下：取新鲜无芽的马铃薯260g加入1升的水煮熟，过滤，得到滤液，向滤液内加入葡萄糖20g、琼脂 20g、大豆蛋白11g、牛肉膏浸出物7g、硫酸镁0.8g、磷酸二氢钾1.1g、麦芽粉4g加热至琼脂全部溶解，补水定容至1L，将获得的溶液置于三角瓶内，塞上透气塞，于122℃灭菌45min，灭菌完成后待溶液降温至70℃时倒入20mm*200mm试管内摆成斜面，冷却至完全凝固后得到斜面培养基。