[发明专利]一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法

权利要求书

1.一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)斜面培养基和保藏液的制备；

(2)斜面菌种的制备：将金针菇菌种接种到步骤(1)制备的斜面培养基中；

(3)保藏菌种的制备：取步骤(2)所得斜面培养基基质菌丝块放于步骤(1)保藏液中封口；

(4)保藏：将所述步骤(3)的金针菇斜面培养基放置于0-6℃恒温血液培养箱保藏；

所述步骤(1)中，斜面培养基原料包括：马铃薯80–400g/L，葡萄糖8–40g/L，琼脂15–25g/L，大豆蛋白5–15g/L，牛肉膏浸出物5–12g/L，硫酸镁0.2–1.2g/L，磷酸二氢钾0.5–2g/L，麦芽粉2–6g/L；

所述步骤(1)中斜面培养基制作步骤如下：取新鲜无芽的马铃薯80-400g加入1升的水煮熟，过滤，得到滤液，向滤液内加入葡萄糖8-40g、琼脂15-25g、大豆蛋白5-15g、牛肉膏浸出物5–12g、硫酸镁0.2–1.2g、磷酸二氢钾0.5–2g、麦芽粉2–6g加热至琼脂全部溶解，补水定容至1L，将获得的溶液置于三角瓶内，塞上透气塞，于119-135℃灭菌30-60min，灭菌完成后待溶液降温至50-80℃时倒入20mm*200mm试管内摆成斜面，冷却至完全凝固后得到斜面培养基。

2.如权利要求1所述的一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法，其特征在于，所述步骤(1)中，斜面培养基制作步骤如下：取新鲜无芽的马铃薯260g加入1升的水煮熟，过滤，得到滤液，向滤液内加入葡萄糖20g、琼脂20g、大豆蛋白11g、牛肉膏浸出物7g、硫酸镁0.8g、磷酸二氢钾1.1g、麦芽粉4g加热至琼脂全部溶解，补水定容至1L，将获得的溶液置于三角瓶内，塞上透气塞，于122℃灭菌45min，灭菌完成后待溶液降温至70℃时倒入20mm*200mm试管内摆成斜面，冷却至完全凝固后得到斜面培养基。

3.如权利要求1所述的一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法，其特征在于，所述步骤(1)中，斜面培养基的制作步骤如下：按上述质量称取马铃薯、葡萄糖、琼脂、大豆蛋白、牛肉膏、硫酸镁、磷酸二氢钾、麦芽粉，先将马铃薯切成4mm薄片，加水1升，烧开，水沸腾5min后关火，过滤，取得滤液于烧杯内，加入其它原料，加热，搅拌至完全溶解，加水定容至1L，用分装器分装到试管内，每个试管定容15mL，塞上硅胶塞，试管放于聚丙烯瓶子内，每10支一组，塞子上盖上铝箔纸，放于电热灭菌锅灭菌，119-135℃灭菌15-25min，灭菌完成后，降温至60-80℃，摆斜面，培养基占试管2/3-3/4长度，培养基完全凝固后得到斜面培养基。

4.如权利要求1所述的一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法，其特征在于，所述步骤(1)中保藏液为0.8-1g氯化钠和100mL纯水。

5.如权利要求1所述的一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法，其特征在于，所述步骤(1)中保藏液的制备方法法包括如下步骤：取0.80-1g氯化钠于三角瓶内，加入纯水定容至100mL，119-135℃灭菌15-25min，冷却至常温得到保藏液。

6.如权利要求1所述的一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法，其特征在于，所述步骤(2)中，斜面培养基的接种操作为，在超净台下开启新风，用酒精对超净台内部消毒，用火焰对接种工具消毒，带接种工具降为室温后，用接种工具刮除斜面培养基的气生菌丝，用接种钩划3*3*3mm的菌丝块，用接种铲取1块放于待接种的斜面培养基底部3cm处，放于培养箱培养，培养温度10-20℃，培养8-15天。

7.如权利要求1所述的一种金针菇斜面菌丝块的保藏方法，其特征在于，将所述步骤(3)的具体方法是，将步骤(2)中所得斜面基质菌丝取(3-6)*(3-6)*(3-6)mm基质菌丝块置于安瓿瓶内，注入步骤(1)所得保藏液，安瓿瓶火焰封口，置于0-4℃保藏箱保藏。