[发明专利]一种血浆中脂溶性维生素高通量检测前处理方法、试剂盒

权利要求书

1.一种血浆中脂溶性维生素高通量检测前处理方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、将待处理血浆样本与内标液混匀后超声振荡孵育；

S2、向步骤S1处理后样品中加入提取试剂，混匀后超声振荡孵育，沉淀蛋白及大分子碳氢化合物；

S3、向步骤S2处理后样品中加入第一磁珠悬浮液，超声振荡，第一磁珠分别与蛋白沉淀、大分子碳氢化合物沉淀、磷脂结合，磁分离去除第一磁珠-蛋白复合物、第一磁珠-大分子碳氢化合物复合物、第一磁珠-磷脂复合，保留液体；

S4、步骤S3处理后的液体进行氮吹浓缩，加入有机溶剂复溶，用以检测分析；

其中，内标液指待测脂溶性维生素的同位素内标液。

2.根据权利要求1所述的一种血浆中脂溶性维生素高通量检测前处理方法，其特征在于，步骤S3还包括步骤进一步净化处理：向第一磁珠处理后的液体中加入第二磁珠悬浮液，超声振荡，第二磁珠分别与残留的蛋白沉淀、大分子碳氢化合物沉淀、磷脂结合，磁分离去除第二磁珠-蛋白复合物、第二磁珠-大分子碳氢化合物复合物、第二磁珠-磷脂复合，保留液体。

3.根据权利要求2所述的一种血浆中脂溶性维生素高通量检测前处理方法，其特征在于，步骤S3中，所述第一磁珠悬浮液与所述第二磁珠悬浮液同时加入或分步加入步骤S2处理后样品中。

4.根据权利要求1所述的一种血浆中脂溶性维生素高通量检测前处理方法，其特征在于，步骤S3中所述第一磁珠用量为1mg-15mg。

5.根据权利要求2所述的一种血浆中脂溶性维生素高通量检测前处理方法，其特征在于，步骤S3中所述第二磁珠用量为1mg-15mg。

6.根据权利要求1-5任意一项所述的一种血浆中脂溶性维生素高通量检测前处理方法，其特征在于，步骤S3中超声振荡的超声波的功率为50W-600W，频率为20KHz-80KHz；步骤S4中复溶所用有机溶剂包括重量百分数为50％-100％的甲醇的或重量百分数为50％-100％的乙腈的水溶液。

7.一种用于血浆中脂溶性维生素高通量检测前处理的试剂盒，包括试剂盒本体，其特征在于，采用如权利要求1所述的一种血浆中脂溶性维生素高通量检测前处理方法对血浆进行检测前处理；所述试剂盒本体包括内标液、提取试剂、第一磁珠悬浮液。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒本体还包括第二磁珠悬浮液。

9.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述内标液与所述血浆样本的体积比为1:1-1:3。

10.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述内标液包括以下至少一种用甲醇或乙醇溶解的内标标准品：维生素A内标、25-羟基维生素D2内标、25-羟基维生素D3内标、维生素E内标和维生素K1内标。

11.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述提取试剂与所述血浆样本的体积比为2:1-8:1。

12.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述提取试剂选自以下至少一种：包含40-100体积份的乙腈、0-40体积份的乙酸乙酯、0-20体积份的烷烃的第一提取试剂；

或，包括包含80-100体积份的乙腈、0-20体积份的烷烃的第二提取试剂；

或，硫酸锰水溶液；

或，磺基水杨酸水溶液。

13.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述第一磁珠、所述第二磁珠均为具有核壳结构的超顺磁性材料，内核为超顺磁性四氧化三铁，壳层表面修饰有功能性官能团；

其中，功能性官能团用于结合所述血浆样本中的蛋白沉淀、大分子碳氢化合物沉淀、磷脂。