[发明专利]一种检测苯醚甲环唑的试纸条及方法有效
| 申请号: | 202010895853.1 | 申请日: | 2020-08-31 |
| 公开(公告)号: | CN112067814B | 公开(公告)日: | 2023-07-11 |
| 发明(设计)人: | 吴小胜;万宇平;王兆芹;朱亮亮;刘玉梅;何方洋 | 申请(专利权)人: | 北京勤邦科技股份有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/558;G01N33/531;G01N33/53 |
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| 地址: | 102206 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 苯醚甲环唑 试纸 方法 | ||
1.一种检测苯醚甲环唑的试纸条,包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板,所述反应膜上具有包被有苯醚甲环唑半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线,所述结合物释放垫上喷涂有苯醚甲环唑单克隆抗体-胶体金标记物;所述苯醚甲环唑单克隆抗体是以苯醚甲环唑半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得;所述苯醚甲环唑半抗原-载体蛋白偶联物由苯醚甲环唑半抗原与载体蛋白偶联得到,所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白或人血清白蛋白;
其特征在于所述苯醚甲环唑半抗原的合成方法为:1)取4.2g苯醚甲环唑杂质1加100mL1,2-二氯乙烷溶解,加入0.12g对甲基苯磺酸,充分搅拌,室温下滴加1.61g液溴,分批滴加,先滴加一半,待颜色变浅后滴加另一半,继续反应2h;反应结束后,加饱和食盐水100mL,充分震荡,静置,分去水相,再加水100mL,震荡,静置,分去水相,有机相浓缩蒸干,得到中间体1;2)将全部的中间体1加100mL N,N-二甲基甲酰胺溶解,加入2.14g KOH,充分搅拌,加入0.47g无水碘化钠,再滴加2mL含有1.8g氨基丙酸的水溶液,油浴加热,90℃反应6h;反应结束后,加水200mL,加6mol/L稀盐酸调节pH至7,再用乙酸乙酯300mL萃取,震荡,静置,分去水相;加饱和食盐水100mL,洗涤,静置,分去水相,有机相浓缩,上硅胶柱,用二氯甲烷和甲醇体积比为10:1的混合溶剂洗脱分离,得到苯醚甲环唑半抗原,其分子结构式为:
2.如权利要求1所述的试纸条,其特征在于所述样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫依次粘贴在底板上。
3.如权利要求1-2任一项所述的试纸条,其特征在于所述结合物释放垫1/3~1/2被覆盖于样品吸收垫下。
4.一种制备权利要求1-3任一项所述试纸条的方法,其包括步骤:
1)制备喷涂有苯醚甲环唑单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫;
2)制备具有包被有苯醚甲环唑半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜;
3)将1)和2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。
5.一种检测果蔬样本中苯醚甲环唑残留的方法,其包括步骤:
1)样品前处理;
2)用权利要求1-3任一项所述的试纸条进行检测;
3)分析检测结果。
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