[发明专利]一种用于多能干细胞向造血干细胞分化的材料和方法有效
| 申请号： | 202010891784.7 | 申请日： | 2020-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN111808812B | 公开（公告）日： | 2020-12-15 |
| 发明（设计）人： | 刘锴 | 申请（专利权）人： | 首都医科大学附属北京友谊医院 |
| 主分类号： | C12N5/0789 | 分类号： | C12N5/0789;A61K35/28;A61P35/02;A61P35/00;A61P7/00;A61P7/06;A61P37/02;A61P1/16;A61P9/10;A61P25/00;A61P3/10;A61P19/08;A61P15/08;A61P5/00 |
| 代理公司： | 北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11690 | 代理人： | 张丹 |
| 地址： | 100032*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 多能 干细胞 造血 分化 材料 方法 | ||
1.一种用于多能干细胞分化的方法，其包括如下步骤：
（1）将多能干细胞接种于培养基Ⅰ中，进行培养；
（2）将步骤（1）的培养体系中的培养基更换为培养基Ⅱ，进行培养；
（3）将步骤（2）的培养体系中的培养基更换为培养基Ⅲ，进行培养；
（4）向将步骤（3）的培养体系中加入所述培养基Ⅲ，进行培养；
其中，
所述培养基Ⅰ包含补充有BMP4、FGF2和VEGF的干细胞培养基Ⅰ；
所述培养基Ⅱ包含补充有SCF和VEGF的干细胞培养基Ⅱ；
所述培养基Ⅲ包含补充有SCF、FLT3L和TPO的干细胞培养基Ⅲ；
所述培养基Ⅰ中，BMP4、FGF2和VEGF的终浓度分别为30-100ng/ml、30-100ng/ml、30-100ng/ml；
所述培养基Ⅱ中，SCF和VEGF的终浓度分别为30-100ng/ml、30-100ng/ml；
所述培养基Ⅲ中，SCF、FLT3L和TPO的终浓度分别为30-100ng/ml、30-100ng/ml、30-100ng/ml。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基Ⅰ中BMP4的终浓度为80ng/ml。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基Ⅰ中FGF2的终浓度为50ng/ml。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基Ⅰ中VEGF的终浓度为80ng/ml。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基Ⅱ中SCF的终浓度为80ng/ml。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基Ⅱ中VEGF的终浓度为80ng/ml。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基Ⅲ中SCF的终浓度分别为50ng/ml。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基Ⅲ中FLT3L的终浓度分别为50ng/ml。
9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基Ⅲ中TPO的终浓度分别为50ng/ml。
10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述干细胞培养基Ⅰ、干细胞培养基Ⅱ、干细胞培养基Ⅲ均为IF9S培养基。
11.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法的步骤均在正常氧气浓度下进行。
12.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述多能干细胞为人类诱导多能干细胞。
13.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法的步骤均在37℃的温度下进行。
14.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）-（4）中培养时间各自独立地为2-3天。
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