[发明专利]枣疯病感病程度快速鉴定方法

权利要求书

1.一种枣疯病感病程度快速鉴定方法，其特征在于，包括：

对待检测植物样本提取DNA，制成预设浓度的工作液；

根据所述工作液的用量，按预设比例，加入特异性扩增引物和2×Taq预混聚合酶链式反应PCR反应液，制成反应体系；

对所述反应体系进行PCR扩增，根据得到扩增条带的循环反应次数，确定枣疯病感病程度；

其中，枣疯病感病程度和得到扩增条带的循环反应次数的对应关系，在相同预设浓度和预设比例条件下，经试验得到。

2.根据权利要求1所述的枣疯病感病程度快速鉴定方法，其特征在于，对所述反应体系进行PCR扩增之后，还包括：

对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，通过凝胶成像系统得到扩增条带的扩增结果。

3.根据权利要求1或2所述的枣疯病感病程度快速鉴定方法，其特征在于，对待检测植物样本提取DNA之前，还包括：

获取不同枣疯病感病程度的测试样本，提取DNA制成相同预设浓度的工作液；

按相同预设比例，加入特异性扩增引物和2×Taq预混聚合酶链式反应PCR反应液，制成反应体系；

对不同枣疯病感病程度的反应体系进行PCR扩增，确定不同枣疯病感病程度得到扩增条带的循环反应次数。

4.根据权利要求1或2所述的枣疯病感病程度快速鉴定方法，其特征在于，所述制成预设浓度的工作液，包括：

对DNA进行浓度测量，并用超纯水将DNA模板配制成浓度为20ng/μl的工作液。

5.根据权利要求4所述的枣疯病感病程度快速鉴定方法，其特征在于，按预设比例，加入特异性扩增引物和2×Taq预混聚合酶链式反应PCR反应液，制成反应体系，包括：

取4μl所述工作液，加入特异性扩增引物R16mF2和R16mR1各0.4μl，2×Taq预混PCR反应液10μl，加入超纯水5.2μl，制成20μl反应体系。

6.根据权利要求5所述的枣疯病感病程度快速鉴定方法，其特征在于，根据得到扩增条带的循环反应次数，确定枣疯病感病程度，具体为：

得到扩增条带的循环次数20、25和30，分别对应枣疯病重度、中度和轻度感染。

7.根据权利要求1所述的枣疯病感病程度快速鉴定方法，其特征在于，所述对待检测植物样本提取DNA，包括：

将研磨好的待检测植物样本用试剂盒进行DNA提取，所选试剂盒为StarSpin柱式植物DNA提取试剂盒。