[发明专利]一种复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法

说明书

本发明提供一种复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法，本发明通过运用制备液相色谱、液相色谱质谱联用(LC‑MS)、核磁共振谱(NMR)、冷冻干燥机等多种技术，对此种杂质进行了分离、制备、纯化、冻干、检测和鉴定，此种杂质可以在复方利多卡因乳膏制剂质量检测中作为杂质对照品。

技术领域

本发明涉及药物分析和药物制剂领域，具体涉及一种复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法。

背景技术

在新药及仿制药研究中，国内外对杂质的研究越来越被重视，ICH和NMPA都相继发布了杂质研究的指导原则，国外药典以及中国药典都对杂质作了专门的规定，而药品研究中所涉及的杂质包括原料药以及制剂中所包含的。对于企业而言，新药和仿制药的报批过程中杂质研究也越来越受重视，对于杂质的研究越透彻，被审评通过的几率就会大大增加，因此杂质的研究对于药品研发过程中所占的比重越来越大，而杂质的分离制备是药物研究中最为关键的技术之一。

丙胺卡因(Prilocaine)，化学名N-(2-甲基苯基)-2-丙胺-丙酰胺，分子式为C₁₃H₂₀N₂O，CAS号为721-50-6。丙胺卡因是一种用于硬膜外、阻滞和浸润等各种手术麻醉的药物，而现在市场上多采取复方制剂，其中包含利多卡因和丙胺卡因两种活性成分。在对复方利多卡因制剂的质量研究中发现一个超标的未知杂质，影响了产品质量，需要进行质量控制。

发明内容

为解决目前复方利多卡因质量控制中存在的问题，本发明提供一种复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法，本发明通过运用制备液相色谱、液相色谱质谱联用(LC-MS)、核磁共振谱(NMR)、冷冻干燥机等多种技术，对此种杂质进行了分离、制备、纯化、冻干、检测和鉴定，此种杂质可以在复方利多卡因乳膏制剂质量检测中作为杂质对照品。

本发明的技术方案如下：

一种复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法，其特征是分离出的杂质分子式为C₁₅H₂₂N₂O，结构式如下：

一种复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法，其特征是包括以下步骤：步骤(1)破坏实验：称取丙胺卡因原料药溶于水中，加入氧化铁粉末，140℃下搅拌加热10小时，待体系冷却后，随后加入流动相溶液，充分混合，过滤待用；

步骤(2)制备液相色谱法分离制备杂质：通过连续三次分离纯化步骤，且每次分离纯化得到的溶液都通过冷冻干燥机干燥后再重新上样。在制备液相色谱的工作站中，收集所需要的此种杂质，并且全程通过液相色谱质谱联用(LC-MS)对分离纯化过程进行跟踪监测；

步骤(3)纯化：对步骤(2)中通过液相色谱质谱联用(LC-MS)监测收集到的分离组分，通过冷冻干燥机进行冻干，得到此种杂质，并且于低温下保存。

所述步骤(1)所述的丙胺卡因原料药与氧化铁粉末的质量比为1:0.5；步骤(1)所述的流动相溶液为甲醇和水，其中甲醇与水的体积比为9:1，丙胺卡因原料药与流动相的质量体积比为1:100；

所述步骤(2)所述的制备液相的条件为：

第一次分离纯化：

仪器：Gilson GX-281制备液相色谱仪和Waters 2767制备液相色谱仪；

色谱柱：Welch Xtimate C₁₈柱(50×250mm，10μm)；

流动相：甲醇-水溶液，甲醇：水＝70-85：30-15(V/V)梯度洗脱；

柱温：室温；

流速：60ml/min；