[发明专利]一种复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法

权利要求书

1.一种复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法，其特征是分离出的杂质分子式为C₁₅H₂₂N₂O，结构式如下：

2.一种复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法，其特征是包括以下步骤：

步骤(1)破坏实验：称取丙胺卡因原料药溶于水中，加入氧化铁粉末，140℃下搅拌加热10小时，待体系冷却后，随后加入流动相溶液，充分混合，过滤待用；

步骤(2)制备液相色谱法分离制备杂质：通过连续三次分离纯化步骤，且每次分离纯化得到的溶液都通过冷冻干燥机干燥后再重新上样。在制备液相色谱的工作站中，收集所需要的此种杂质，并且全程通过液相色谱质谱联用(LC-MS)对分离纯化过程进行跟踪监测；

步骤(3)纯化：对步骤(2)中通过液相色谱质谱联用(LC-MS)监测收集到的分离组分，通过冷冻干燥机进行冻干，得到此种杂质，并且于低温下保存；所述步骤(1)所述的丙胺卡因原料药与氧化铁粉末的质量比为1∶0.5；步骤(1)所述的流动相溶液为甲醇和水，其中甲醇与水的体积比为9∶1，丙胺卡因原料药与流动相的质量体积比为1∶100。

3.根据权利要求1所述的复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法，其特征是所述步骤(2)所述的制备液相的条件为：

第一次分离纯化：

仪器：Gilson GX-281制备液相色谱仪和Waters 2767制备液相色谱仪；

色谱柱：Welch Xtimate C₁₈柱(50×250mm，10μm)；

流动相：甲醇-水溶液，甲醇∶水＝70-85∶30-15(V/V)梯度洗脱；

柱温：室温；

流速：60ml/min；

进样体积：5ml；

压力：29bar；

检测波长：232nm；

第二次分离纯化：

仪器：Waters 2767制备液相色谱仪；

色谱柱：Welch Xtimate C₁₈柱(30×150mm，5μm)；

流动相：乙腈-水溶液，乙腈∶水＝30-50∶70-50(V/V)梯度洗脱；

柱温：室温；

流速：35ml/min；

进样体积：1ml；

压力：1480psi；

检测波长：232nm；

第三次分离：

仪器：Waters 2767制备液相色谱仪；

色谱柱：Welch Xtimate C₁₈柱(30×150mm，5μm)；

流动相：乙腈-水溶液，乙腈∶水＝30-65∶70-35(V/V)梯度洗脱；

柱温：室温；

流速：35ml/min；

进样体积：0.5ml；

压力：1450psi；

检测波长：232nm。

4.根据权利要求1所述的复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法，其特征是所述步骤(3)中收集到的组分通过冷冻干燥机冻干得到，冻干条件为-86℃、0.02MPa；样品纯度鉴定条件为，仪器：Waters液相色谱质谱联用仪；分析柱：Innoval ODS-2，4.6×250mm，5μm；流动相：甲醇∶水＝70∶30(V/V)，其中水为含0.1％氨水的水溶液，等度洗脱；柱温：室温；流速：1ml/min；进样体积：50μL；检测波长：232nm；所制备杂质的纯度大于95％。

5.一种根据权利要求1所述的复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法，其特征是所述复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的结构鉴定为：

所收集的杂质组分采用质谱(MS)以及核磁共振谱(NMR)对杂质进行分析，最后确证其分子式和结构式，分子式为C₁₅H₂₂N₂O，结构式如下：