[发明专利]一种形成多花黄精多芽健壮发育根茎的繁育方法

权利要求书

1.一种形成多花黄精多芽健壮发育根茎的繁育方法，其特征在于，它包括以下步骤：

a)外植体的选取及预处理：选取多花黄精地下根茎作为外植体；该外植体预处理包括依次对外植体进行清洗、切余料以及消毒，所述切余料为将外植体切去多余的根茎，剥去芽体上的苞片，保留中间的带芽根茎块；当年的9-10月份选取栽种2-3年的多花黄精地下根茎作为外植体；所述带芽根茎块的体积约1.0cm×1.0cm×0.5cm； 具体地操作为：将多花黄精地下根茎用水刷洗干净，去掉叶片和根系，切去周围多余的根茎，剥去芽体上能剥掉的苞片，取中间的带芽根茎块，该带芽根茎块的体积约1.0cm×1.0cm×0.5cm；再将带芽根茎块用流动的自来水冲洗1-2小时，将其晾干；再将其置于超净工作台上用75％的酒精浸泡15s，无菌水冲洗2-4次后，再投入0.1％的升汞中，不停摇晃，持续8-10min后取出，再用无菌水冲洗5-8次，最后用无菌滤纸将无菌水吸干备用；

b)增殖壮苗培养：将消毒处理过的带芽根茎块用解剖刀削去芽顶，再将其接入增殖壮苗培养基上进行培养，直至块茎膨大、芽体粗壮以及块茎颜色变深得到一号根茎块；该增殖壮苗培养基为：MS＋1.0mg/L 6－BA＋0.5mg/L NAA＋糖90g/L，该增殖壮苗培养基的pH值控制在5.5－5.7；

c)分化培养：将一号根茎块进行分切成体积均匀的一号单元根茎块接入分化培养基中培养，直至芽体伸长抽出叶子得到二号根茎块；该分化培养基为：MS＋1.0mg/L 6－BA＋0.5mg/L NAA＋0.2mg/L IBA＋糖30g/L，该分化培养基的pH值控制在5.5－5.7；所述二号根茎块用解剖刀削去芽点，切成0.5cm×0.5cm的二号单元根茎块接入上述增殖壮苗培养基进行循环培养数代，即可得到大量的二号根茎块；

d)生根培养：将二号根茎块进行分切成体积均匀的三号根茎块，并且确保每块三号根茎块上至少有三个健壮芽，将其转接到生根培养基培养直至得到多芽同时带有三个以上发育健壮带根苗的种根茎块，该生根培养基为： MS＋1.0mg/L 6－BA＋0.5mg/L NAA＋0.2mg/L IBA＋活性炭0.5g/L＋糖60g/L，该生根培养基的pH值控制在5.5－5.7；

e) 出苗时种根茎的处理：将种根茎块敞开培养瓶炼苗3天后取出，用自来水冲去琼脂，再用800倍液百菌灵浸泡15分钟后，再用50 mg/L 6－BA浸泡3小时；

f)大棚移栽：将种根茎块栽种到装有基质的育苗筛中，冬春季采用单层70%的遮阳网遮荫，每隔7天施用1次营养液；夏秋季采用双层70%的遮阳网遮荫，见土层表面发白时就要浇水，夏季一般一周间隔浇一次水和施一次肥。

2.如权利要求1所述的一种形成多花黄精多芽健壮发育根茎的繁育方法，其特征在于：所述步骤b)中带芽根茎块接入增殖壮苗培养基中培养的时间控制在42-47天；所述步骤c)中一号单元根茎块接入分化培养基中培养的时间也控制在42-47天；所述步骤d)中三号根茎块接入生根培养基中培养的时间也控制在42-47天；所述一号单元根茎块的体积约1.0cm×1.0cm×0.5cm；所述三号根茎块约1.5cm×1.5cm。

3.一种形成多花黄精多芽健壮发育根茎的繁育方法，其特征在于，它包括以下步骤：

a)外植体的选取及预处理：选取多花黄精地下根茎作为外植体；该外植体预处理包括依次对外植体进行清洗、切余料以及消毒，所述切余料为将外植体切去多余的根茎，剥去芽体上的苞片，保留中间的带芽根茎块；

b)增殖壮苗培养：将消毒处理过的带芽根茎块用解剖刀削去芽顶，再将其接入增殖壮苗培养基上进行培养，10天后，根茎周围膨大，长出愈伤，后陆续冒出芽点，块茎膨大直至长出根系，培养时间3个月以上得到种根茎，每块种根茎上有3个以上发育健壮的带根苗；该增殖壮苗培养基为：MS＋1.0mg/L 6－BA＋0.5mg/L NAA＋糖90g/L，该增殖壮苗培养基的pH值控制在5.5－5.7；

c)出苗时种根茎的处理；将种根茎块敞开培养瓶炼苗3天后取出，用自来水冲去琼脂，再用800倍液百菌灵浸泡15分钟后，再用50 mg/L 6－BA浸泡3小时；

d)大棚移栽：将种根茎块栽种到装有基质的育苗筛中，冬春季采用单层70%的遮阳网遮荫，每隔7天施用1次营养液；夏秋季采用双层70%的遮阳网遮荫，见土层表面发白时就要浇水，夏季一般一周间隔浇一次水和施一次肥。