[发明专利]用于西尼罗河病毒检测的试剂、试剂盒、检测方法及应用在审
申请号: | 202010852040.4 | 申请日: | 2020-08-21 |
公开(公告)号: | CN111996291A | 公开(公告)日: | 2020-11-27 |
发明(设计)人: | 吴江;林彦星;黄超华;史卫军;花群义;阮周曦;贾鹏;曹琛福;曾少灵;林永涛 | 申请(专利权)人: | 深圳海关动植物检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人: | 李小焦;彭家恩 |
地址: | 518000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 尼罗河 病毒 检测 试剂 试剂盒 方法 应用 | ||
1.一种用于西尼罗河病毒检测的试剂,其特征在于:所述试剂包括引物对和探针,所述引物对的上游引物为Seq ID No.1所示序列,所述引物对的下游引物为Seq ID No.2所示序列,所述探针为Seq ID No.3所示序列或者Seq ID No.3所示序列的反向互补序列;
Seq ID No.1:5’-CCTGATTGAATTGGAACCACCCTTTGGAGACTCAT-3’
Seq ID No.2:5’-AGTCCCAAGCTGTATCTCCTAGGGCGGCTAATCTC-3’
Seq ID No.3:5’-CATAGTGGTGGGCAGAGGAGAACAACAGATTAATCACCATTGGCACAAGTC-3’
Seq ID No.3所示序列的探针中,第30个碱基修饰荧光基团6-FAM-Dt,第31个碱基替换为碱基类似物dSpacer,第34个碱基修饰荧光淬灭基团BHQ1-dT,3’末端修饰C3 Spacer。
2.根据权利要求1所述的用于西尼罗河病毒检测的试剂,其特征在于:所述探针的5’端标记有FAM荧光基团,探针的3’端标记有BHQ1淬灭基团。
3.根据权利要求1或2所述的用于西尼罗河病毒检测的试剂在制备西尼罗河病毒检测试剂盒、检测试纸条或检测芯片中的应用。
4.一种用于西尼罗河病毒检测的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中含有权利要求1或2所述的用于西尼罗河病毒检测的试剂。
5.根据权利要求4所述的用于西尼罗河病毒检测的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中还含有冻干酶粉、再水化缓冲液、醋酸镁溶液、去离子水。
6.一种非诊断治疗目的的检测西尼罗河病毒的方法,其特征在于:包括采用权利要求1或2所述的用于西尼罗河病毒检测的试剂,或者权利要求4或5所述的用于西尼罗河病毒检测的试剂盒,对待测样品进行一步法逆转录重组酶聚合酶扩增,并采用荧光检测仪收集荧光。
7.根据权利要求6所述的检测西尼罗河病毒的方法,其特征在于:所述一步法逆转录重组酶聚合酶扩增的反应条件为,39℃恒温反应15分钟。
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