[发明专利]一种免疫/光动力抗肿瘤功能干细胞及其制备方法

说明书

本发明公开了一种免疫/光动力抗肿瘤功能干细胞及其制备方法，采用本发明中的方法制得的功能干细胞具有肿瘤趋向性、免疫豁免性优势，可搭载多种治疗剂，并实现靶向递送，具有免疫/光动力抗肿瘤功能，可用于肿瘤治疗中的药物靶向递送和联合治疗。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种功能干细胞，具体涉及一种免疫/光动力抗肿瘤功能干细胞及其制备方法。

背景技术

在肿瘤临床治疗中，治疗方式仍然以手术、放疗、化疗为主，由于传统治疗方法存在一定的不良后果和局限性，因此，迫切需要研究开发新的肿瘤治疗方法和策略，随着医学和科技的发展，一些新的治疗方式和策略被尝试和应用。

肿瘤免疫治疗通过激活和增强机体自身的免疫活性发挥抗肿瘤效果，可高效抑制转移和消除肿瘤。此外，免疫治疗可使机体获取免疫记忆作用，有效防止肿瘤复发。肿瘤的细胞因子治疗是一种非特异性免疫治疗方式，其中白介素12(IL12)是一种多效细胞因子，由于其能活化先天性免疫和适应性免疫，成为了肿瘤免疫治疗的理想候选者。然而，高剂量的IL12直接使用存在严重的毒副作用，低剂量使用则疗效低于预期，这极大的限制了其临床应用。基因治疗方式的引入，可以显著提高白介素12的治疗功效，同时降低毒副作用，以克服临床应用困难。肿瘤基因治疗(Gene Therapy)是将具有矫正作用的基因或者具有治疗作用的基因导入细胞，从而实现肿瘤治疗的目的，RNA干扰沉默和治疗基因的表达是基因治疗两种主要方式。治疗基因的表达通过上调目标蛋白表达量而增强肿瘤治疗效果，白细胞介素(IL12)基因表达产物可以有效地在体内外抑制肿瘤生长或杀伤肿瘤细胞。

此外，与单一治疗相比，联合治疗能整合优势获得更好治疗效果。光动力治疗(PDT)在肿瘤治疗领域表现出了巨大的应用潜力，具有微创、高效、可控优势，可与多种治疗方式结合进行联合治疗。光动力治疗通过产生活性氧(Reactive oxygen species，ROS)选择性的损伤肿瘤组织而实现治疗目标。另外，光动力治疗处理会导致肿瘤相关抗原释放，从而引发相应的免疫应答反应，进一步增强免疫抗肿瘤效果，因此，免疫与光动力联合治疗将实现更高效的肿瘤治疗。

然而，不管是基因治疗还是光动力治疗，治疗剂的有效递送都是至关重要的，一方面要实现靶向递送，另一方面要有效保护治疗剂。这便需要递送载体的参与。细胞载体(cell carrier)一般是指存在于机体本身或在某些因素诱导下产生，可以将抗癌药物靶向运输到肿瘤细胞的一类细胞。该类细胞具有其他药物载体无法比拟的生物相容性和生物可降解性，它不但增加药物的稳定性，延长药物的半衰期，而且增强其生物靶向性；此外被包埋药物的缓慢、持续低剂量释放可以减轻药物的毒副作用。目前研究较多的是红细胞和细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)。首先是红细胞作为药物载体的研究主要集中在抗肿瘤药物方面，放线菌素D是研究最早的红细胞包载的抗肿瘤药物之一，研究发现对其表面进行修饰后其具有一定的靶向性。其次是细胞因子诱导杀伤细胞，通常该细胞用于肿瘤的免疫治疗，最近有研究将其用于载药。这些工作为研究细胞作为抗肿瘤药物载体奠定了基础，但这些细胞载体存在靶向性低，规模化、标准化制备困难等问题。因此，需要更加高效的靶向治疗体系。而骨髓间充质干细胞(BMSC)作为一种新兴的生物载体，其表面表达的趋化因子受体CXCR-4能与肿瘤细胞高表达的基质衍生因子SDF-1特异性识别，从而趋向于肿瘤组织迁移，可实现治疗剂的生物靶向递送，将治疗剂高效递送至肿瘤部位。

因此，我们选取了骨髓间充质干细胞(BMSC)作为细胞载体应用于肿瘤治疗。BMSC具有易于获取和分离优势，在体外易于扩增等特性，且表现出低免疫原性，应用于机体无免疫排斥反应，以及其自身具有良好的肿瘤趋向性，综上所述，以BMSC作为载体的药物递送是一种更有希望的肿瘤治疗策略。

发明内容