[发明专利]感染性眼病病原体固相多重联排PCR检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.感染性眼病病原体固相多重联排PCR检测试剂盒，其特征在于，包括：PCR混合液、固相化引物和探针、阳性对照、阴性对照、无RNase水；所述的固相化引物和探针为经固相化处理后的8种疱疹病毒引物和探针，分装于三联排PCR管内，每个PCR管内有2～3种疱疹病毒引物和不同荧光标记的探针，实现同时对8种疱疹病毒的检测，所述的8种疱疹病毒相应的靶标基因分别为：HSV1的US1基因,HSV2的US1基因,VZV的ORF32基因,EBV的BDLF2基因,CMV的UL84基因,HHV6的DNA polymerase processivity factor基因,HHV7的UL42基因与HHV8的ORF36基因；

所述的8种疱疹病毒引物和探针为：

针对HSV1病毒的US1基因设计的HSV1引物对和探针：

上游引物：5’-TCCGGGACGTTTTCTGGATG-3’，如SEQ ID NO.1所示；

下游引物：5’-TCAGACTCCGATGAGAGGGG-3’，如SEQ ID NO.2所示；

HSV1探针：5’-CCAGGCGCTTTTGCGCCTTG-3’，如SEQ ID NO.3所示；5’端标记荧光报告基团6FAM，3’端标记荧光淬灭基团BQ1；

针对HSV2病毒的US1基因设计的HSV2引物对和探针：

上游引物：5’-TCGCCACTATGGCAGACATC-3’，如SEQ ID NO.4所示；

下游引物：5’-GGGCTTACCCTCAGATTCCG-3’，如SEQ ID NO.5所示；

HSV2探针：5’-CAGACGCCCCGTCCTCCCCAGCTCG-3’，如SEQ ID NO.6所示；5’端标记荧光基团CY5，3’端标记荧光淬灭基团BQ3；

针对VZV病毒的ORF32基因设计的VZV引物对和探针：

上游引物：5’-CCGTCGTCTATCGCACATCA-3’，如SEQ ID NO.7所示；

下游引物：5’-ATTGTACCGGCGTGTGTTCT-3’，如SEQ ID NO.8所示；

VZV探针：5’-TCCGTCCAAACAGTGCGCTTCA-3’，如SEQ ID NO.9所示；5’端标记荧光基团HEX，3’端标记荧光淬灭基团BQ1；

针对EBV病毒的BDLF2基因设计的EBV引物对和探针：

上游引物：5’-AGCCTGTAGATTTGGGCACC-3’，如SEQ ID NO.10所示；

下游引物：5’-CAACAACACGGACAGCCTTG-3’，如SEQ ID NO.11所示；

EBV探针：5’-TACATGGAGGGCAGCCGCCT-3’，如SEQ ID NO.12所示；5’端标记荧光基团6FAM，3’端标记荧光淬灭基团BQ1；

针对CMV病毒的UL84基因设计的CMV引物对和探针：

上游引物：5’-CGGGTCTAGCTCCAATCGTC-3’，如SEQ ID NO.13所示；

下游引物：5’-GGGCTTACCCTCAGATTCCG-3’，如SEQ ID NO.14所示；

CMV探针：5’-TGTGGTTTCCGAGAGGCGCG-3’，如SEQ ID NO.15所示；5’端标记荧光基团CY5，3’端标记荧光淬灭基团BQ3；

针对HHV6病毒的DNA polymerase processivity factor基因设计的HHV6引物对和探针：

上游引物：5’-TCTCGCACCACTTCTTGTCC-3’，如SEQ ID NO.16所示；

下游引物：5’-TACGAGGGTTTTGGTGACGG-3’，如SEQ ID NO.17所示；

HHV6探针：5’-TGCACACAGGGAACCGACGC-3’，如SEQ ID NO.18所示；5’端标记荧光基团CY5，3’端标记荧光淬灭基团BQ3；

针对HHV7病毒的UL42基因设计的HHV7引物对和探针：

上游引物：5’-TAGCGTCCACCTCACTCGTA-3’，如SEQ ID NO.19所示；

下游引物：5’-GGTCGTTGCTTACTTTGCGG-3’，如SEQ ID NO.20所示；

HHV7探针：5’-GCAGGCAAGGAGGATCAATGAACCC-3’，如SEQ ID NO.21所示；5’端标记荧光基团HEX，3’端标记荧光淬灭基团BQ1；

针对HHV8病毒的ORF36基因设计的HHV8引物对和探针：

上游引物：5’-CTTGCGTCCTCTTCCAGTGT-3’，如SEQ ID NO.22所示；

下游引物：5’-AGGGCTGATAGGGTACGGTT-3’，如SEQ ID NO.23所示；

HHV8探针：5’-TGCACGCGCAGGTATTGGACC-3’，如SEQ ID NO.24所示；5’端标记荧光基团HEX，3’端标记荧光淬灭基团BQ1。