[发明专利]一种单纯疱疹病毒1型实时定量PCR检测试剂盒在审
| 申请号: | 202010842867.7 | 申请日: | 2020-08-20 |
| 公开(公告)号: | CN112063751A | 公开(公告)日: | 2020-12-11 |
| 发明(设计)人: | 姚玉峰;许叶圣;郑利斌 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 万尾甜;韩介梅 |
| 地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 单纯 疱疹病毒 实时 定量 pcr 检测 试剂盒 | ||
1.一种单纯疱疹病毒1型实时定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒是针对以HSV1的UL40基因为靶目标的,包括HSV1的特异性引物和特异性探针、阳性对照、阴性对照、2×PCR Mix、无RNase水;所述的HSV1的特异性引物和特异性探针为:
上游引物:5’-CCCCTGCTGCCATGGATTC-3’
下游引物:5’-GGGCACTTTGGAATCTGGA-3’
探针:5’-TGGCAACGCGGCCCAAC-3’
所述探针的5’端有用荧光染料标记的荧光报告基团,3’端有用淬灭荧光染料标记的荧光淬灭基团。
2.根据权利要求1所述的单纯疱疹病毒1型实时定量PCR检测试剂,其特征在于,所述探针5’端标记的荧光报告基团为6FAM,3’端标记的荧光淬灭基团为BHQ1。
3.根据权利要求1所述的单纯疱疹病毒1型实时定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所述的阳性对照为HSV1靶基因UL40的重组质粒。
4.根据权利要求1所述的单纯疱疹病毒1型实时定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所述的阴性对照为生理盐水。
5.根据权利要求1所述的单纯疱疹病毒1型实时定量PCR检测试剂盒,其特征在于,20μLPCR反应体系中含:2×PCR Mix为10μL,上游引物、下游引物、探针各0.2μL,核酸标本、阳性对照、阴性对照共2μL,无RNase水7.4μL。
6.根据权利要求1所述的单纯疱疹病毒1型实时定量PCR检测试剂盒,其特征在于,当核酸标本的扩增曲线呈S型,且Ct值38,则为阳性,根据标准曲线计算病毒载量;当核酸标本的扩增曲线呈S型,且38≤Ct40,需复检,当复检结果扩增曲线呈S型,且Ct38或38≤Ct40,判定结果该基因核酸检测为阳性,根据标准曲线计算病毒载量;否则为阴性。
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