[发明专利]α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法、α-L-岩藻糖苷酶诊断试剂及应用

权利要求书

1.一种α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

采用4-氨基苯基β-D-吡喃半乳糖苷作为底物；

加入α-L-岩藻糖苷酶，将4-氨基苯基β-D-吡喃半乳糖苷水解生成对氨基酚；

向溶液中加入Cu²⁺、Ag⁺或者Hg²⁺的中性溶液，反应一段时间；

然后加入发光QDs，反应一段时间；

利用分子荧光分光光度计检测反应后溶液的荧光信号，或者在365nm紫外灯照射下，裸眼读取溶液颜色变化。

2.根据权利要求1所述的α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法，其特征在于，所述发光QDs为CdTe QDs或者CdSe QDs。

3.根据权利要求2所述的α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法，其特征在于，所述CdTe QDs的制备方法包括以下步骤：

将CdCl₂和柠檬酸三钠溶解在水中，向以上溶液中加入巯基丙酸；

调节以上溶液pH至碱性；

然后，将Na₂TeO₃和KBH₄加入以上溶液中，回流，至溶液呈红色，在紫外灯下呈现出强烈的红色荧光；

最后，通过沉淀和离心纯化CdTe QDs溶液。

4.根据权利要求1所述的α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法，其特征在于，所述4-氨基苯基β-D-吡喃半乳糖苷和所述α-L-岩藻糖苷酶均加入pH为7.4的缓冲液中。

5.根据权利要求4所述的α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法，其特征在于，所述4-氨基苯基β-D-吡喃半乳糖苷、所述α-L-岩藻糖苷酶以及所述缓冲液在37℃下发生水解反应。

6.根据权利要求1所述的α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法，其特征在于，荧光信号变化与α-L-岩藻糖苷酶活性的对数在0.1-100U/L范围内呈现线性，其线性方程为Y＝ALogC+B，线性相关系数R²为0.982。

7.一种α-L-岩藻糖苷酶诊断试剂，其特征在于，包括：Cu²⁺、Ag⁺或Hg²⁺其中之一的中性溶液，缓冲溶液，4-氨基苯基β-D-吡喃半乳糖苷，以及发光QDs。

8.一种α-L-岩藻糖苷酶诊断试剂的应用，其特征在于，所述α藻糖-岩藻糖苷酶诊断试剂用于辅助诊断肝癌。