[发明专利]具有启动子活性的多核苷酸及其在生产氨基酸中的应用有效
| 申请号: | 202010838604.9 | 申请日: | 2020-08-19 |
| 公开(公告)号: | CN113201536B | 公开(公告)日: | 2022-09-13 |
| 发明(设计)人: | 郑平;刘娇;孙际宾;周文娟;石拓;郭轩;马延和 | 申请(专利权)人: | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/77;C12N15/53;C12N1/21;C12P13/08;C12R1/15 |
| 代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 | 代理人: | 刘新宇;李茂家 |
| 地址: | 300308 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 具有 启动子 活性 多核苷酸 及其 生产 氨基酸 中的 应用 | ||
1.一种具有启动子活性的多核苷酸,其特征在于,所述多核苷酸的序列为如SEQ IDNO:10-25任一项所示的序列。
2.一种转录表达盒,其特征在于,包含权利要求1所述的具有启动子活性的多核苷酸。
3.根据权利要求2所述的转录表达盒,其特征在于,所述转录表达盒还含有蛋白编码基因,所述蛋白编码基因与所述具有启动子活性的多核苷酸可操作地连接。
4.一种重组表达载体,其特征在于,包含权利要求1所述的具有启动子活性的多核苷酸,或权利要求2-3任一项所述的转录表达盒。
5.一种重组宿主细胞,其特征在于,包含权利要求2-3任一项所述的转录表达盒,或者权利要求4所述的重组表达载体。
6.根据权利要求5所述的重组宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞来源于棒状杆菌属、短杆菌属、节杆菌属、微杆菌属或埃希氏菌属。
7.根据权利要求6所述的重组宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为谷氨酸棒杆菌。
8.根据权利要求7所述的重组宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为谷氨酸棒杆菌ATCC 13032、谷氨酸棒杆菌ATCC 13869或谷氨酸棒杆菌ATCC 14067。
9.一种根据权利要求1所述的具有启动子活性的多核苷酸、权利要求2-3任一项所述的转录表达盒、权利要求4所述的重组表达载体,或者权利要求5-8任一项所述的重组宿主细胞在制备用于增强基因转录水平的试剂或试剂盒中的应用。
10.一种根据权利要求4所述的重组表达载体,或权利要求5-8任一项所述的重组宿主细胞在制备蛋白或生产氨基酸中的应用。
11.根据权利要求10所述的重组表达载体,其特征在于,所述蛋白为参与合成氨基酸的酶。
12.根据权利要求11所述的重组表达载体,其特征在于,所述参与合成氨基酸的酶为二氨基庚二酸脱氢酶。
13.根据权利要求10所述的重组表达载体,其特征在于,所述氨基酸包括L-赖氨酸及其衍生物,其中,所述衍生物包括戊二胺、5-氨基戊酸和戊二酸中的至少一种。
14.一种增强目标基因表达的方法,其特征在于,所述方法包括将权利要求1所述的具有启动子活性的多核苷酸与目标基因可操作地连接的步骤。
15.一种制备蛋白的方法,其特征在于,选择权利要求2-3任一项所述的转录表达盒,权利要求4所述的重组表达载体,或权利要求5-8任一项所述的重组宿主细胞表达所述蛋白。
16.根据权利要求15所述的制备蛋白的方法,其特征在于,所述蛋白为参与合成L-赖氨酸的酶。
17.根据权利要求16所述的制备蛋白的方法,其特征在于,所参与合成L-赖氨酸的酶包括天冬氨酸激酶、天冬氨酸半醛脱氢酶、天冬氨酸氨裂合酶、二氢吡啶二羧酸合成酶、二氢吡啶甲酸还原酶、琥珀酰二氨基庚二酸氨基转移酶、四氢吡啶二羧酸酯琥珀酰酶、琥珀酰二氨基庚二酸脱酰基酶、二氨基庚二酸差向异构酶、二氨基庚二酸脱酰基酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、赖氨酸运输蛋白、转酮酶、二氨基庚二酸脱氢酶和丙酮酸羧化酶中的一种或两种以上的组合。
18.根据权利要求17所述的制备蛋白的方法,其特征在于,所述蛋白为二氨基庚二酸脱氢酶。
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