[发明专利]一种测定人血浆中舒尼替尼浓度的方法

说明书

本发明公开了一种测定人血浆中舒尼替尼浓度的方法，包括以下步骤：A、配置标准工作液：精确称取舒尼替尼标准品5mg置于5mL容量瓶，用50％甲醇的水溶液溶解并定容于5mL,得到标准储备液，将标准储备液用50％的甲醇进行稀释，分别在含有130‑14000ng/mL舒尼替尼的浓度范围内配制出若干种标准工作液，并在‑20℃条件下保存；B、获取标准工作液的标准曲线方程，得到标准曲线方程为y＝a*x+b，其中a和b为权重系数；C、处理待测血液样品：采集血样，并对血样进行离心处理，取离心后的上清液至于对应的无菌EP管中，标记后放置在‑20℃的环境下保存；D、制备进样品；E、定量测量血药的浓度：采用二维液相色谱法对进样品进行测定，得到舒尼替尼稳态血药的浓度。

技术领域

本发明涉及医疗检测领域，特别是涉及一种测定人血浆中舒尼替尼浓度的方法。

背景技术

苹果酸舒尼替尼(索坦)是一种小分子多靶点酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)，主要作用于VEGFR1-3、PDGFRα和β、KIT、FLT-3、CSF-1R和RET等靶点，具有很强的抑制肿瘤细胞增殖和抗血管生成的双重作用。临床主要用于治疗不能手术的晚期肾细胞癌(RCC)，不可切除的转移性高分化进展期胰腺神经内分泌瘤(pNET)的成年患者以及甲磺酸伊马替尼治疗失败或不能耐受的胃肠间质瘤(GIST)。舒尼替尼在不同人群中的疗效和不良反应存在明显的差异：如疲劳乏力的发生在亚洲人群中占18.4％，而在欧洲人群占58.5％；黏膜炎或口腔炎的发生率在美国人群中为22.9％，而在欧洲人群中为42.1％；腹泻的发生在亚洲人群中占17.6％，而在美国占34.4％；同时据未统计的数据显示，舒尼替尼在临床上的疗效也存在显著差异，这些因素给临床医生患者合理使用舒尼替尼带来了困难。

血药浓度是指血浆中的药物浓度。有关舒尼替尼药效学和药代动力学的Meta分析研究显示，舒尼替尼的暴露量越高，疾病进展期越长，总体生存率(OS)越高，肿瘤缩小的尺寸越大，但随之不良反应的风险也就越大。一项共纳入521例服用舒尼替尼的转移性肾癌患者的回顾性研究显示，在服药第29天，由于无法耐受舒尼替尼的毒性而减量的患者，体内血药谷浓度(舒尼替尼+活性代谢产物N-去乙基舒尼替尼)与那些未减量患者体内的谷浓度相似。而且，减量的患者治疗周期更长，PFS更长，这说明患者体内药物的总暴露量比患者服用剂量更能反应舒尼替尼的药物效应。根据临床前药代动力学/药效学的数据推理显示，有效血药浓度(舒尼替尼+SU12662)(total trough level,TTL)要50-100ng/mL才能有效抑制血小板源性生长因子受体β(platelet－derivedgrowth factor recepter,PDGFRβ)和VEGFR2，浓度范围较窄。与临床前研究结果一致，舒尼替尼的一期临床试验研究结果显示,与TTL＞50ng/mL的患者相比，TTL＜50ng/mL的肾癌患者效果明显降低。因此，每个患者TTL必须大于50ng/mL。由于患者的个体间差异、治疗期间的联合用药等其他因素，导致舒尼替尼暴露量的差异非常大。

舒尼替尼治疗指数窄，不同人群个体间系统暴露量、疗效和不良反应差异大，且血药浓度/暴露量与临床效应呈正相关，这些因素均表明患者在服用舒尼替尼过程中需要通过血药浓度监测为科学合理、安全有效、个体化精准治疗提供参考。而目前舒尼替尼血药浓度监测尚未在国内临床实践中广泛开展，分析原因可能与其监测方法的种类较少、要求较高，中国人群舒尼替尼治疗窗尚未明确以及缺乏监测意识等有关。近期研究表明，国内外针对舒尼替尼进行监测的方法只有液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)，而LC-MS/MS所用质谱仪昂贵、液质的“基质效应”影响因素大、重现性较低且对操作人员要求较高。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一种测定人血浆中舒尼替尼浓度的方法，具有新型、快速、灵敏、可操作性强、重现性好、成本价格低廉的优点。

本发明的技术方案是：

一种测定人血浆中舒尼替尼浓度的方法，包括以下步骤：