[发明专利]一种NT-proBNP检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种NT-proBNP检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括磁微粒偶联的NT-proBNP单克隆抗体和碱性磷酸酶标记的NT-proBNP单克隆抗体；

所述磁微粒偶联的NT-proBNP单克隆抗体中NT-proBNP单克隆抗体结合处于42～46位氨基酸的NT-proBNP表位；

所述碱性磷酸酶标记的NT-proBNP单克隆抗体包括均采用碱性磷酸酶标记的第一NT-proBNP单克隆抗体和第二NT-proBNP单克隆抗体，所述第一NT-proBNP单克隆抗体结合处于13～24位氨基酸的NT-proBNP表位，所述第二NT-proBNP单克隆抗体结合处于63～71位氨基酸的NT-proBNP表位；所述磁微粒偶联的NT-proBNP单克隆抗体、碱性磷酸酶标记的第一NT-proBNP单克隆抗体、碱性磷酸酶标记的第二NT-proBNP单克隆抗体分别与待测样本中NT-proBNP抗原的3个表位结合，形成“夹心”复合物，所述磁微粒的浓度为2～8mg/mL，所述NT-proBNP单克隆抗体浓度为20～500 ug/mL，所述第一NT-proBNP单克隆抗体和所述第二NT-proBNP单克隆抗体的浓度均为600～1200 ug/mL。

2.根据权利要求1所述的一种NT-proBNP检测试剂盒，其特征在于，所述磁微粒表面的活性基团为-COOH或-NH₂，所述磁微粒的大小为0.8μm～3μm。

3.根据权利要求1所述的一种NT-proBNP检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括所述磁微粒偶联的NT-proBNP单克隆抗体的稀释液，配方为：0.1%BSA、0.05%Proclin300、0.02%吐温20、0.02M pH7.4的PB缓冲液。

4.根据权利要求1所述的一种NT-proBNP检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括所述碱性磷酸酶标记的NT-proBNP单克隆抗体的稀释液，配方为：0.9%氯化钠，1mM六水合氯化镁，0.1mM无水氯化锌，0.1%牛血清白蛋白、0.05%Proclin300，0.02M pH7.4 的Tris-HCl缓冲液。

5.根据权利要求1所述的一种NT-proBNP检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括校准品，所述校准品是用校准品稀释液配制的NT-proBNP重组蛋白，所述校准品稀释液配方为：0.9%氯化钠、0.1%牛血清白蛋白、3%海藻糖、0.05%Proclin300、0.02M pH7.4 的PB缓冲液。

6.根据权利要求1所述的一种NT-proBNP检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括发光底物，所述发光底物主要成分为：3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷二钠盐，简称AMPPD。

7.根据权利要求1所述的一种NT-proBNP检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括清洗液，所述清洗液配方为：0.9%氯化钠、0.01%吐温20、0.05%Proclin300、0.02M pH7.4 的Tris-HCl缓冲液。