[发明专利]同时检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌O157:H7/NM的Taqman探针引物组及其试剂盒在审
| 申请号： | 202010832505.X | 申请日： | 2020-08-18 |
| 公开（公告）号： | CN112029876A | 公开（公告）日： | 2020-12-04 |
| 发明（设计）人： | 汪华;杨学军;汪胜;潘萍 | 申请（专利权）人： | 衡阳市市场监督检验检测中心 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/14;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/42;C12R1/19;C12R1/445 |
| 代理公司： | 广东有知猫知识产权代理有限公司 44681 | 代理人： | 李小波 |
| 地址： | 421000 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 同时 检测 沙门氏菌 金黄色 葡萄球菌 大肠 埃希氏菌 o157 h7 nm taqman 探针 | ||
1.一种同时检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌O157:H7/NM的Taqman探针引物组，其特征在于，包括3对特异性引物，分别是引物对invA-F和invA-R、引物对ropB-F和ropB-R、引物对rfbE-F和rfbE-R，其分别具有如SEQ ID No.1至SEQ ID No.6所示的序列。
2.根据权利要求1所述的Taqman探针引物组，其特征在于，所述引物对invA-F和invA-R、引物对ropB-F和ropB-R、引物对rfbE-F和rfbE-R对应的探针分别为invA-P、ropB-P和rfbE-P。
3.一种同时检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌O157:H7/NM的Taqman探针试剂盒，其特征在于，所述Taqman探针试剂盒20μL，含有Premix Ex Taq(2×)10μL、模板1μL、参比荧光剂ROX(5×)0.5μL、3对特异性引物及其探针3.3μL，余量为去离子水，其中所述的3对特异性引物分别是引物对invA-F和invA-R、引物对ropB-F和ropB-R、引物对rfbE-F和rfbE-R，其分别具有如SEQ ID No.1至SEQ ID No.6所示的序列；探针分别为invA-P、ropB-P和rfbE-P。
4.根据权利要求2所述的Taqman探针试剂盒，其特征在于，所述模板由下述方法制备：取培养过夜的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌O157:H7/NM菌液各1mL至7mL无菌水中，涡旋振荡混匀，作为10倍稀释液；分别将上述混合菌液稀释100倍、500倍、1000倍、2000倍、4000倍、8000倍、16000倍，备用；吸取上述各稀释度的混合菌液100μL至1.5mL离心管中，于沸水中裂解10min，然后10000rpm，离心10min，取上清液即得所述模板。
5.根据权利要求2所述的Taqman探针试剂盒，其特征在于，所述Taqman探针试剂盒中invA-F、invA-R和invA-P分别为0.2μL；ropB-F、ropB-R和ropB-P分别为0.4μL；rfbE-F、rfbE-R和rfbE-P分别为0.5μL。
6.根据权利要求2所述的Taqman探针试剂盒，其特征在于，所述Taqman探针试剂盒使用条件为：95℃预变性30-50s，退火温度58-62℃，34s，35个循环。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于衡阳市市场监督检验检测中心，未经衡阳市市场监督检验检测中心许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010832505.X/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
