[发明专利]一种用高效液相色谱测定帕拉米韦中间体异构体的方法

说明书

一种用高效液相色谱测定帕拉米韦中间体异构体的方法，其特征在于：采用的色谱柱为多糖衍生物涂敷型手性色谱柱；采用的流动相为异丙醇与正己烷的混合溶液，在高效液相色谱系统中采用等度洗脱；所述流动相中，异丙醇与正己烷的体积比为10:90～20:80；所述流动相的流速为0.8～1.0 ml/min；采用的检测器为紫外检测器，监测波长为215nm。本发明克服了现有技术的不足，解决了帕拉米韦中间体异构体的分析测定问题，能够有效控制目标产物及其异构体杂质含量，免除异构体杂质对后续合成反应的干扰，提高后续制备帕拉米韦的质量，确保用药安全。本发明为帕拉米韦中间体的异构体测定提供了一种准确的、高效的检测方法。

技术领域

本发明属于药物分析化学领域，特别涉及一种用高效液相色谱测定帕拉米韦中间体的异构体的方法。

背景技术

帕拉米韦是一种新型的抗流感病毒药物，属神经氨酸酶抑制剂。现有临床试验已经证明帕拉米韦对甲型和乙型流感有效。帕拉米韦由美国BioCryst制药公司的科学家通过基于结构的设计和药物化学的方法设计和发现。研发团队由Y.S.Babu博士领导。该药的分子结构和化学物质在2000年9月的《药物化学杂志》首次公布。在被命名为帕拉米韦前，它被称为BCX-1812。2009年1月，帕拉米韦获得美国食品和药物管理局批准进入研发审批的快速通道，其注射剂并被批准在紧急情况下用于治疗某些已知或怀疑甲型H1N1流感住院的患者。国外对帕拉米韦抗病毒的体内外试验和临床试验结果显示，该药物能有效抑制各种流感病毒株的复制和传播过程，具有耐受性好、毒性小等优点。

现有技术公开的帕拉米韦多种合成方法中，涉及到一种帕拉米韦中间体。

帕拉米韦中间体，化学名为(3AR,4R,6S,6AS)-4-[叔丁氧羰基氨基]-3-(1-乙基丙基)-3A,5,6,6A-四氢-4H-环戊并[D]异恶唑-6-羧酸甲酯，其CAS号为：229613-93-8，分子式为C₁₈H₃₀N₂O₅，分子量为：354.4412，化学结构式为：

（1）

该分子含有4个手性碳原子。理论上存在多个光学异构体，但根据其反应机理及合成方法推断，帕拉米韦中间体合成过程中通常只涉及一对对映异构体，以及两个构造异构体。上式（1）为目标分子，其对映异构体的化学结构式为：

（2）；

其中，涉及的构造异构体1的化学结构式为：

（3）；

涉及的构造异构体2的化学结构式为：

（4）。

其中，式（2）、式（3）、式（4）均为合成帕拉米韦过程中的杂质。

在整个合成路线中，帕拉米韦中间体作为合成帕拉米韦的关键中间体，控制其异构体的含量可以有效的获得高纯度的帕拉米韦。因此在帕拉米韦中间体步骤控制手性纯度非常必要。

目前，还没有文献材料公开过使用高效液相色谱（HPLC）测定帕拉米韦中间体及其异构体的方法。

发明内容

本发明提供一种用高效液相色谱（HPLC）测定帕拉米韦中间体的异构体的方法，其目的是要解决现有技术没有公开过高效液相色谱有效分析帕拉米韦中间体及其异构体方法的问题。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种用高效液相色谱测定帕拉米韦中间体异构体的方法，包括以下步骤：其特征在于：

步骤一，溶液配置：

分别取帕拉米韦中间体的三种异构体，即杂质A、杂质B和杂质C，用同配比的异丙醇和正己烷的混合溶液配置杂质A定位溶液、杂质B定位溶液和杂质C定位溶液；