[发明专利]用于免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测的标记物组合、方法及系统

说明书

本发明公开了一种用于免疫检查点PD‑1/PD‑L1动态监测的标记物组合、方法及系统。该方法采用Opal/TSA多标记免疫荧光技术在肿瘤组织中同时检测多个与肿瘤免疫相关的标志物并结合Vectra自动多光谱定量病理图像分析系统进行数据处理。本发明的方法可以对肿瘤免疫抑制剂的实际用药进行指导，在同一组织上，不同免疫检测点以及免疫细胞标志物均可检测到信号，不仅能够对细胞进行亚分型，并获得各个表型的细胞，对肿瘤患者治疗前后的疗效判断以及指导肿瘤免疫治疗提供理论依据。还可以为肿瘤免疫治疗疗效提供动态检测，更好的指导临床用药，使更多肿瘤患者能受益于免疫治疗；在检测靶点上比常规免疫组化检测技术更加丰富和更直观。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种用于免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测的标记物组合、方法及系统。

背景技术

当今社会,由于人口老龄化、生活方式和生存环境等多种因素的影响,癌症已成为全社会日益关注的焦点问题。据WHO的数据，全球范围内有1/6的人口死亡是由于罹患癌症，同时有1/2的人群会在整个生命周期中出现不同种类的肿瘤。近年来，作为肿瘤治疗新的革命性技术，免疫治疗尤其是免疫检查点治疗模式发展迅猛，多个程序性死亡受体/配体-1(PD-1/PD-L1)抑制剂在肺癌、肝癌、黑色素瘤等十几种恶性肿瘤中迅速得到临床批准。如何提高PD-1/PD-L1抑制剂的疗效，并对疗效进行精准评估和动态监测成为临床界最关注的问题。

PD-1/PD-L1免疫疗法是一种当前备受瞩目的抗肿瘤疗法，旨在利用人体自身的免疫系统对抗肿瘤细胞。前者是免疫T细胞表面的一种受体，后者是癌细胞分泌的。当两者结合时，通过传递抑制信号阻止免疫T细胞活化，免疫T细胞将被窒息并促使癌细胞生长。但是，现有的通过PD-1或PD-L1蛋白抗体进行的重度免疫疗法，阻止了PD-1和PD-L1的识别，从而恢复了T细胞的正常识别和防御攻击功能，并杀死了肿瘤细胞。PD-1表达于多种肿瘤组织中的肿瘤浸润型淋巴细胞，包括头颈部癌、黑色素瘤和非小细胞肺癌(non-small-celllung cancer,NSCLC)；PD-L1也在多种恶性肿瘤中高表达，如NSCLC等。然而，PD-1/PD-L1抑制剂(如Nivolumab和Pembrolizumab等)因其在多种恶性肿瘤中临床疗效良好且患者能获得长期缓解，被认为是有潜力的抗肿瘤药物，但总体应答率仅为20-30％，且可产生获得性抵抗，以及其高发的耐药问题(包括原发性及获得性耐药)仍不容忽视。目前研究显示抗PD-1/PD-L1单抗的原发性耐药与肿瘤免疫微环境动态变化、肿瘤突变负荷及致癌通路激活等因素相关。

PD-L1表达具有时空异质性，其表现为空间和时间两个方面。空间异质性表现为PD-L1表达在同一肿瘤的不同位置，这种位置的异质性意味着穿刺部位不同导致PD-L1表达检测结果不同。空间异质性还表现为肿瘤转移到不同部位后PD-L1表达也不尽相同，如肾上腺和肝脏转移灶活检组织PD-L1表达通常比较高，转移灶位于骨骼或者头颅时PD-L1表达比较低。时间异质性表现为随着病程的延长，肿瘤PD-L1表达也会发生动态变化。