[发明专利]用于免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测的标记物组合、方法及系统

权利要求书

1.一种用于免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测的标记物组合，其特征在于：所述标记物组合由PD-1、PD-L1、CD3、CD8、CD68和CK组成。

2.一种用于免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测的方法，其特征在于：包括如下步骤：

1)收集免疫治疗前后的石蜡包埋肿瘤样本；

2)利用多色免疫荧光组织化学技术检测用于评估免疫治疗疗效的标记物组合；所述标记物组合由PD-1、PD-L1、CD3、CD8、CD68和CK组成；

3)利用Vectra自动多光谱定量病理图像分析系统采集多标记的实验结果并详细分析PD-1/PD-L1相关的免疫表型；所述定量病理图像分析系统包括PerkinElmer多光谱成像设备和inForm2.4图像定量分析软件；

4)根据所获得以上结果，提交PD-1/PD-L1表达状态的分子报告。

3.根据权利要求2所述用于免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测的方法，其特征在于：所述步骤1)中的肿瘤样本包括均处于中晚期的肺癌、恶性黑色素瘤、尿路上皮癌、肾癌、胰腺癌、乳腺癌、头颈部和胃肠道肝胆系统的恶性肿瘤细胞。

4.根据权利要求2或3所述的用于免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测的方法，其特征在于：所述步骤2)中，多色免疫荧光组织化学技术依次检测相应的PD-1/PD-L1免疫检查点和淋巴细胞、巨噬细胞标记物；在检测过程中，需要注意抗体和不同荧光染料的最佳搭配以及检测顺序。

5.根据权利要求2或3所述的用于免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测的方法，其特征在于：所述步骤3)中，采用PerkinElmer多光谱成像设备和inForm2.4图像定量分析软件详细分析PD-1/PD-L1相关的免疫表型，在阴性对照和阳性对照的协助下，可完成每个指标的单通道分析，肿瘤与间质区域的区分，组织分割、细胞分割以及感兴趣免疫表型的新发现及定量获取。

6.根据权利要求4所述的用于免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测的方法，其特征在于：所述步骤3)中，采用PerkinElmer多光谱成像设备和inForm2.4图像定量分析软件详细分析PD-1/PD-L1相关的免疫表型，在阴性对照和阳性对照的协助下，可完成每个指标的单通道分析，肿瘤与间质区域的区分，组织分割、细胞分割以及感兴趣免疫表型的新发现及定量获取。

7.根据权利要求2或3或6所述的用于免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测的方法，其特征在于：所述步骤4)中，提交PD-1/PD-L1表达状态的分子报告，在完成每个指标的详细分析中，对比免疫治疗前后的样本，对获取的PD-1/PD-L1相关的免疫表型和细胞毒性T细胞的改变，提交分子报告。

8.一种用于免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测的系统，其特征在于：包含如权利要求1所述的标记物组合；或者采用如权利要求2或3或6所述的用于免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测的方法，以实现免疫检查点PD-1/PD-L1动态监测功能。