[发明专利]一种乙酰半胱氨酸雾化吸入溶液所含乙二胺四醋酸二钠的检测方法

说明书

本发明属于化学药物分析技术领域，涉及一种乙酰半胱氨酸雾化吸入溶液所含乙二胺四醋酸二钠的检测方法。采用高效液相色谱法进行检测：所述的色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A：精密量取40％四丁基氢氧化铵溶液5.0mL，加水稀释至1000mL，用磷酸调节pH值至2.5；流动相B：乙腈；柱温：30℃；检测器：紫外检测器；流速：1.0mL/min；检测波长：260nm；进样量：20μL；洗脱方式：等度洗脱，流动相A和流动相B的体积比为88:12。本发明采用高效液相色谱法，能将目标产物峰与供试品溶液中其他峰有效分离。

技术领域

本发明属于化学药物分析技术领域，涉及一种乙酰半胱氨酸雾化吸入溶液所含乙二胺四醋酸二钠的检测方法。

背景技术

乙酰半胱氨酸(Acetylcysteine)从上世纪60年代开始作为祛痰药广泛应于临床，是临床上作用机制最全面的祛痰药物。

乙酰半胱氨酸结构中的巯基非常活泼，有氧化剂存在时，2个乙酰半胱氨酸分子中的巯基可形成二硫键，生成乙酰胱氨酸。因此企业在生产乙酰半胱氨酸雾化吸入溶液过程中通常加入一定量的乙二胺四醋酸二钠用作金属螯合剂，在药物剂型中起到抗氧、稳定作用。乙二胺四醋酸二钠易与钙鳌合，长期大剂量使用可引起低血钙症，因此控制乙二胺四醋酸二钠的加入量是非常必要的。乙二胺四醋酸二钠通常也被称为EDTA-2Na、依地酸二钠。

目前乙酰半胱氨酸雾化吸入溶液现行国家标准为进口药品注册标准，标准号为JX20020133，尚未对乙二胺四醋酸二钠的含量进行控制，各企业处方中添加乙二胺四醋酸二钠的量也各不相同。中国药典2015版对乙二胺四醋酸二钠的控制方法均为容量法，无法实现对微量乙二胺四醋酸二钠的质量控制。文献中普遍采用高效液相色谱法测定样品中的乙二胺四醋酸二钠的含量，通常选择硫酸铜或三氯化铁分别加入对照品溶液和供试品溶液中进行络合反应。我们也做了相关试验，结果发现，硫酸铜或三氯化铁与乙二胺四醋酸二钠进行络合反应的同时，还会与乙酰半胱氨酸发生氧化还原反应，严重影响反应产物的生成，无法建立供试品检测方法。研究发现采用高效液相色谱法，乙酰胱氨酸雾化吸入溶液供试品溶液色谱图中杂峰较多，会干扰目标产物的检测。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种乙酰半胱氨酸雾化吸入溶液所含乙二胺四醋酸二钠的检测方法。

发明思路：发明人发现硫酸铜或三氯化铁与乙二胺四醋酸二钠进行络合反应的同时，还会与乙酰半胱氨酸发生氧化还原反应，严重影响反应产物的生成，无法建立高效液相检测方法。于是发明人选择三氯化铁与维生素C反应生成二氯化铁作为金属离子络合剂，分别加入对照品溶液和供试品溶液中进行络合反应。维生素C的存在将Fe³⁺还原为Fe²⁺，然后与乙二胺四醋酸二钠发生络合反应，反应稳定，稍过量的三氯化铁不影响反应产物的色谱行为。研究发现采用高效液相色谱法，乙酰胱氨酸雾化吸入溶液供试品溶液色谱图中杂峰较多，会干扰目标产物的检测。

为解决上述技术问题，本发明公开了一种乙酰半胱氨酸雾化吸入溶液所含乙二胺四醋酸二钠的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行检测：

其中，所述的色谱条件如下：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流动相A：精密量取40％四丁基氢氧化铵溶液5.0mL，加水稀释至1000mL，用磷酸调节pH值至2.5；

流动相B：乙腈；

柱温：30℃；

检测器：紫外检测器；

流速：1.0mL/min；

检测波长：260nm；

进样量：20μL；