[发明专利]一种SiO2

权利要求书

1.一种SiO₂-MWCNTs有酶催化葡萄糖电化学传感器制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

步骤1：取0.01-0.05gSiO₂纳米粉末，对SiO₂纳米粉末进行充分碾磨，将碾磨后的SiO₂纳米粉末添加到碳纳米管NMP分散液中；

步骤2：向碳纳米管NMP分散液中加入1ml去离子水，用超声波清洗机持续震动2d，将碾磨后的SiO₂纳米粉末与碳纳米管NMP分散液混合均匀，分散后充分得到SiO₂-MWCNTs复合材料；

步骤3：称取0.0700g硫堇加入烧杯中，向烧杯中加入40℃的去离子水进行溶解；

步骤4：将溶解的硫堇溶液倒入至25mL棕色容量瓶定容得到0.01M硫堇溶液；

步骤5：取0.001g氯金酸于烧杯中，再向烧杯中加入去离子水通过玻璃棒进行充分搅拌；

步骤6：将烧杯中的氯金酸溶液加热至沸腾后滴入0.01％柠檬酸钠，待颜色不变，再加热15min，得到纳米金溶液；

步骤7：拿取玻碳电极依次用直径0.3μm和直径0.05μm氧化铝粉末打磨至镜面；

步骤8：再将打磨后的玻碳电极用去离子水冲洗干净，置于无水乙醇中超声波清洗15min，再置于去离子水中再次超声波清洗15min；

步骤9：将清洗后的玻碳电极置于硫酸溶液中，用循环伏安法在电位范围为-0.6～1.0V扫描15-25圈使电极活化；

步骤10：活化完成后用去离子水冲洗干净，置于去离子水中备用；

步骤11：取4μl步骤2中制备好的SiO₂-MWCNTs复合材料，滴涂在经过活化后玻碳电极的表面，放置于4-8℃冰箱中保存约4h使之形成一层均匀的固体薄膜；

步骤12：再分别滴涂4μL硫堇、4μL纳米金、4μL葡萄糖氧化酶，每一层修饰后均储存在4-8℃冰箱中保存约4h，待固定好后继续修饰下一层，使之形成一层均匀的固体薄膜。

2.根据权利要求1所述的一种SiO₂-MWCNTs有酶催化葡萄糖电化学传感器制备方法，其特征在于：在步骤2中氯金酸和柠檬酸钠溶液皆采用分析纯。

3.根据权利要求2所述的一种SiO₂-MWCNTs有酶催化葡萄糖电化学传感器制备方法，其特征在于：在步骤9中硫酸溶液浓度为0.1M。

4.一种SiO₂-MWCNTs有酶催化葡萄糖电化学传感器应用，其特征在于：包括如下步骤：

步骤1：称取一定量磷酸氢二钾至烧杯中，向烧杯中加入去离子水溶解定容制备成浓度为0.1mol/L的PBS缓冲溶液A液；

步骤2：称取一定量磷酸二氢钠至另一只烧杯中，向该烧杯中加入去离子水溶解定容制备成浓度为0.1mol/L的PBS缓冲溶液B液；

步骤3：将步骤1和步骤2中的A、B液以一定的比例混合成pH＝7.00的PBS缓冲溶液；

步骤4：称取一定量葡萄糖于PBS缓冲溶液溶解，定容配制成浓度为0.1M的葡萄糖溶液，并使用超纯水梯度稀释制备得到用于检测的标准液；

步骤5：称取一定量铁氰化钾于超纯水中溶解，定容配制成0.1M的铁氰化钾溶液；

步骤6：取唾液4μL稀释一万倍；

步骤7：将步骤3中得到的pH＝7.00的PBS缓冲溶液和步骤5中得到的铁氰化钾溶液作为底液，采用三电极体系进行检测，设定工作条件；

步骤8：在0.05M PBS(pH＝7)中，用循环伏安法对电极修饰过程的电化学性质进行表征；

步骤9：在步骤7的工作条件下，移取5mLPBS于电解槽中，从最低浓度开始依次取葡萄糖标准液，每个浓度依次取1μL、2μL、4μL、5μL、7μL、8μL、9μL且取一次测一次累加到底液中；用磁力搅拌器将待检测底液搅拌1-2min使其混合均匀，检测完成后绘制出标准曲线；

步骤10：在步骤7的工作条件下，移取5mLPBS于电解槽中，将步骤6中制备好的样品1μL搅拌1-2min混合均匀后检测，并由上述步骤9得到的标准曲线计算出样品浓度。