[发明专利]促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法及其微生态制剂与应用

说明书

本发明提供了一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法及其微生态制剂与应用，涉及微生态制剂技术领域，所述方法为在发酵培养的过程中加入诱导液，所述诱导液为凝结芽孢杆菌孢子液。鉴于现有凝结芽孢杆菌生产过程中，往往存在活菌浓度与产孢率两者很难兼顾的问题，本申请创造性的在发酵培养的过程中加入凝结芽孢杆菌孢子液作为诱导液进行发酵培养，进而有效提高了凝结芽孢杆菌的产孢率，缩短芽孢形成时间，大幅度提高了生产效率，降低了生产成本。

技术领域

本发明涉及微生态制剂技术领域，尤其是涉及一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法及其微生态制剂与应用。

背景技术

随着饲料全面禁抗时代的到来，饲料中不允许再使用抗生素，因此，养殖行业面临着前所未有的挑战。微生态制剂作为替抗产品之一，具有调节肠道健康，提高免疫力，提高饲料消化利用率，减少废弃物排放等作用。微生态制剂常用的菌种有枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、嗜酸乳酸菌、植物乳杆菌、酿酒酵母等，其中乳酸菌类由于其抗逆性差、货架期短等因素一直未得到广泛的使用。

近年来，一类新的益生菌菌株进入我们的视野，那就是凝结芽孢杆菌，凝结芽孢杆菌是一类不仅可以产乳酸，而且可以形成芽孢的菌株，其具有抗逆性强，能耐高温，便于饲料生产加工中添加与应用的特点。然而与常用的枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌相比，凝结芽孢杆菌的高密度发酵扩培与芽孢生成技术都比较困难，使得凝结芽孢杆菌培养后发酵液活菌数与芽孢率都比较低，最终导致凝结芽孢杆菌活菌制剂价格居高不下，未能得到很好的推广与应用。

同时，现有饲料领域中使用的凝结芽孢杆菌，其扩培后需要进行高温喷雾干燥处理生成粉剂后使用，只有形成芽孢后的凝结芽孢杆菌对高温才有耐受性，所以发酵液的活菌浓度与产孢率都显得极其重要。事实上，在实际生产中都会通过提高发酵培养基的浓度获得高密度的菌液，但是，营养丰富的培养基往往不利于芽孢的形成，只有在营养缺乏的情况下更有利于芽孢形成。

因此，研究开发一种可以兼顾活菌数和芽孢率的凝结芽孢杆菌的培养方法，变得十分必要和迫切。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法，该方法在发酵培养的过程中加入凝结芽孢杆菌孢子液作为诱导液进行发酵培养，能够有效提高凝结芽孢杆菌的产孢率，缩短芽孢形成时间，大幅度提高了生产效率，降低了生产成本。

本发明的第二目的在于提供一种凝结芽孢杆菌，所述凝结芽孢杆菌由上述促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法制备得到，所述制得的凝结芽孢杆菌的芽孢形成率为95～98％。

本发明的第三目的在于提供一种微生态制剂，该微生态制剂包含上述凝结芽孢杆菌。

本发明的第四目的在于提供一种上述凝结芽孢杆菌、上述微生态制剂在制备饲料产品中的应用。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明提供的一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法，所述方法包括：在发酵培养的过程中加入诱导液；

所述诱导液包括凝结芽孢杆菌孢子液。

进一步的，所述凝结芽孢杆菌孢子液中，染色镜检凝结芽孢杆菌的芽孢形成率为90～95％。

进一步的，所述方法包括以下步骤：

(A)、制备种液：将凝结芽孢杆菌菌株接种于种液培养基中进行种液培养，染色镜检凝结芽孢杆菌的芽孢形成率大于90％，随后灭活未形成芽孢的菌体，得到凝结芽孢杆菌种液；

(B)、菌体扩培：将步骤(A)得到的凝结芽孢杆菌种液接种于扩培培养基中，进行扩增培养，得到扩培发酵液；

(C)、芽孢诱导：将诱导液加入扩培发酵液中，诱导培养，得到芽孢形成率为95～98％的凝结芽孢杆菌；