[发明专利]稳定剂、凝血酶时间测试试剂及其制备方法、试剂盒

说明书

本发明公开了一种稳定剂、凝血酶时间测试试剂及其制备方法、试剂盒，稳定剂包括黄原胶，凝血酶时间测试试剂包括凝血酶、缓冲液和稳定剂；所述稳定剂包括黄原胶，所述黄原胶在所述凝血酶时间测试试剂中的浓度为0.1g/L～10g/L，所述凝血酶的酶活性为1IU/mL～50IU/mL。本发明利用黄原胶大分子的网状结构，显著提高了液体型凝血酶时间测试试剂的稳定性。

技术领域

本发明涉及医疗检验技术领域，更具体地，涉及一种稳定剂、凝血酶时间测试试剂及其制备方法、试剂盒。

背景技术

凝血酶时间(Thrombin Time，TT)是测定凝血功能检测的一项重要指标，也是术前检查的重要指标。TT测定是检查血浆纤维蛋白原转变为纤维蛋白的能力以及血浆中肝素样物质的多少。增高见于DIC纤溶亢进期，低(无)纤维蛋白原血症，异常血红蛋白血症，纤维蛋白(原)降解产物增高；降低无临床意义。

目前市面上的TT测试试剂大部分为冻干粉，使用前需要进行复溶，操作不便，瓶间精密性无法保证，而液体型试剂可以克服冻干粉带来的缺陷，提高试剂的精密度。但是液体型试剂最主要的成分是凝血酶，凝血酶是一种多功能的丝氨酸蛋白酶，和大多数蛋白酶一样，稳定性相对较差，容易受PH、温度、离子强度等的影响，从而导致酶的空间结构改变影响试剂检测结果的准确性和灵敏度。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种稳定剂、稳定的液体型凝血酶时间测试试剂及其制备方法和试剂盒。

为实现上述目的，本发明的一种技术方案如下：

一种稳定剂，用于凝血酶时间测试试剂，包括黄原胶。

本发明还公开了一种凝血酶时间测试试剂，包括凝血酶、缓冲液和上述稳定剂；所述黄原胶在所述凝血酶时间测试试剂中的浓度为0.1g/L～10g/L。

本发明还提供了上述凝血酶时间测试试剂的制备方法，包括以下步骤：

制备缓冲液；

将凝血酶和稳定剂溶解在缓冲液中，所述稳定剂包括黄原胶，所述黄原胶在所述凝血酶时间测试试剂中的浓度为0.1g/L～10g/L，得所述凝血酶时间测试试剂。

本发明还公开了一种试剂盒，包括上述的稳定剂，或上述的凝血酶时间测试试剂。

实施本发明实施例，将具有如下有益效果：

本发明实施例通过采用黄原胶为稳定剂，由于黄原胶大分子具有网状结构，可产生筛孔效应，能够对凝血酶进行空间限位，降低了凝血酶分子之间的相互碰撞，一定程度上提高了凝血酶的稳定性；另一方面，黄原胶还具有很强的亲水性，使得水的自由度变小，加强了凝血酶的疏水作用；凝血酶的疏水基团与黄原胶大分子上的疏水基团或孔发生相互作用，使凝血酶吸附到黄原酸大分子上，进一步增加了液体中凝血酶分子的稳定性。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明公开了一种稳定剂，其用于凝血酶时间测试试剂，更进一步的，用于液体型凝血酶时间测试试剂，其包括黄原胶。黄原胶是一种多糖，它是淡黄色粉末状至微粘状的高分子物质，是由D-葡萄糖、D-甘露糖、D-葡萄糖醛(酸)、乙酸与丙酮组成的“五糖重复单位”复合物，黄原胶大分子具有网状结构，可产生筛孔效应，能够对凝血酶进行空间限位，降低了凝血酶分子之间的相互碰撞，一定程度上提高了凝血酶的稳定性；另一方面，黄原胶还具有很强的亲水性，使得水的自由度变小，加强了凝血酶的疏水作用；凝血酶的疏水基团与黄原胶大分子上的疏水基团或孔发生相互作用，使凝血酶吸附到黄原酸大分子上，进一步增加了凝血酶分子的稳定性。