[发明专利]一种氢氧化细菌S-1-4及其筛选方法在审
申请号: | 202010773028.4 | 申请日: | 2020-08-04 |
公开(公告)号: | CN112300958A | 公开(公告)日: | 2021-02-02 |
发明(设计)人: | 王琳;孙静;刘蓓;梁晓萍;邵明明;李妮;李小峰;李媛;贺红艳 | 申请(专利权)人: | 西安医学院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/02;C12R1/01 |
代理公司: | 西安弘理专利事务所 61214 | 代理人: | 王丹 |
地址: | 710021*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 氢氧化 细菌 及其 筛选 方法 | ||
1.一种氢氧化细菌S-1-4,其特征在于,分类命名为微杆菌属S-1-4(Microbacteriumsp.S-1-4),于2020年7月10日由中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号为CCTCC No:M2020301。
2.根据权利要求1所述的一种氢氧化细菌S-1-4,其特征在于,所述氢氧化细菌S-1-4的生态学特征为:透明,圆形,边缘整齐,小,革兰氏阳性。
3.一种氢氧化细菌S-1-4的筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,样品采集:采集生长旺盛且不含吸氢酶的结瘤豆科植物根际土壤;
步骤2,土壤富集:将采集的土壤样品置于持续通H2的培养装置,富集土壤中的氢氧化细菌S-1-4;
步骤3,菌种分离与纯化:土壤稀释涂布于矿质盐培养基平板,置入密闭容器,室温倒置培养,待平板长出明显菌落,挑取单菌落用稀释涂布法进一步纯化;
步骤4,菌种筛选:对纯化后的菌株进行氢化酶活性测定和菌株自养能力的鉴定。
4.根据权利要求3所述的一种氢氧化细菌S-1-4的筛选方法,其特征在于,所述菌种分离与纯化,包括将采集的根际土壤制成土壤悬液,在超净工作台上将土壤悬液连续梯度稀释,将每个梯度的稀释液都均匀涂布在MSA矿质盐平板培养基上,倒置培养于气体循环体系,室温条件下培养三周,观察培养基上细菌的生长情况,挑取大小形态颜色不同的菌落,划线到矿质盐培养基上连续培养,每个菌落纯化三次以上,获得最初的氢氧化细菌S-1-4疑似菌株,将其转接到牛肉膏蛋白胨试管斜面上,4℃保藏备用。
5.根据权利要求4所述的一种氢氧化细菌S-1-4的筛选方法,其特征在于,所述MSA矿质盐平板培养基组成为:4.9g~5.1g(NH4)2SO4,0.01g~0.02g FeSO4·7H2O,0.4~0.6gMgSO4,1.1g~1.3g K2HPO4,0.13g~0.15g KH2PO4,0.01g~0.02g CaCl2,4.9g~5.1g NaCl,19.8g~20.2g琼脂,蒸馏水995mL~1005mL,pH值7.1~7.3。
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