[发明专利]一种尿苷磷酸酶突变体及其应用有效
| 申请号： | 202010772689.5 | 申请日： | 2020-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN111748537B | 公开（公告）日： | 2021-11-26 |
| 发明（设计）人： | 范文超;王金刚;梁岩;高书良;袁圣伦;任亮 | 申请（专利权）人： | 浙江华睿生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N1/21;C12P19/38;C12P19/30;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海申浩律师事务所 31280 | 代理人： | 贾师英 |
| 地址： | 313000 浙江省湖州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 磷酸酶 突变体 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种尿苷磷酸酶突变体，其氨基酸序列为SEQ ID NO:3。
2.编码如权利要求1所述尿苷磷酸酶突变体的基因。
3.如权利要求2所述的基因，其特征在于，核苷酸序列为SEQ ID NO:4。
4.一种微生物，其表达如权利要求3所述的基因。
5.如权利要求4所述的微生物，其特征在于，所述微生物选自大肠杆菌、毕赤酵母、枯草芽孢杆菌。
6.一种生产如权利要求1所述尿苷磷酸酶突变体的方法，其特征在于，通过如权利要求5所述微生物的发酵获得。
7.一种生产烟酰胺核糖的方法，其特征在于，以核糖-1-磷酸和烟酰胺为底物，使用如权利要求1所述的尿苷磷酸酶突变体催化合成烟酰胺核糖。
8.一种生产β-烟酰胺单核苷酸的方法，其特征在于，以鸟苷、磷酸盐、烟酰胺和ATP为底物，使用由嘌呤核苷磷酸化酶、烟酰胺核糖激酶和如权利要求1所述的尿苷磷酸酶突变体构成的三酶体系，催化一锅法合成β-烟酰胺单核苷酸。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，反应体系为磷酸盐缓冲液，pH5.0-9.0；反应温度为30-40℃。
10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述烟酰胺核糖激酶是Saccharomycescerevisiae S288C来源的烟酰胺核糖激酶。
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