[发明专利]一组墨地龙冬瓜InDel分子标记引物及其应用

权利要求书

1.一组墨地龙冬瓜InDel分子标记引物，其特征在于，包括7个点位所对应的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.14所示。

2.如权利要求1所述的一组墨地龙冬瓜InDel分子标记引物在墨地龙冬瓜杂交种纯度鉴定方面的应用。

3.一种利用权利要求1所述的InDel分子标记引物鉴定墨地龙冬瓜纯度的方法，其特征在于，首先提取墨地龙冬瓜待检测样品种子的基因组DNA作为模板，然后利用所述InDel分子标记引物进行PCR扩增，最后通过电泳对扩增产物进行检测，通过对父母本与杂交种的带型进行比对，得到真杂交种数与可观测到条带的种子总数的比例，即杂交纯度。

4.根据权利要求3所述的鉴定墨地龙冬瓜纯度的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

1)预处理：对墨地龙冬瓜的杂交种子进行温汤浸种，浸种完成后用清水冲洗掉种子表面的粘液，然后将种子置于清水中在室温下保存8～12小时，沥干水分备用；

2)DNA提取：对步骤1)所得的种子进行催芽生根，待胚根长至1cm以上时选取根尖组织加入碱液并用沸水加热，然后加入缓冲液进行中和，将提取液冷却至室温；

3)PCR扩增：以步骤2)所得的提取液中的DNA为模板，加入至少一对InDel分子标记引物进行PCR扩增，获得扩增产物；

4)电泳：利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对步骤3)所得的扩增产物进行分离，使不同大小的扩增产物处于不同的位置；

5)银染检测：利用硝酸银染色液和显影液使凝胶上的条带显现，拍照观察并统计条带差异；

6)统计结果：对比父母本与杂交种子的带型，同时具有父母本双方特征带的种子为真正的杂交种，杂交种的数量与显现出条带的种子总数的比例即为杂交纯度。

5.如权利要求1所述的一组墨地龙冬瓜InDel分子标记引物在墨地龙冬瓜遗传图谱构建中的应用。

6.如权利要求1所述的一组墨地龙冬瓜InDel分子标记引物在墨地龙冬瓜遗传多样性分析中的应用。

7.如权利要求1所述的一组墨地龙冬瓜InDel分子标记引物在墨地龙冬瓜分子辅助育种中的应用。