[发明专利]一种基于LAMP技术的小条实蝇属FARQ复合体的鉴定方法及其专用引物组有效

专利信息
申请号: 202010743692.4 申请日: 2020-07-29
公开(公告)号: CN114058709B 公开(公告)日: 2023-08-01
发明(设计)人: 李志红;张岳 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C12Q1/6888 分类号: C12Q1/6888;C12Q1/6844;C12N15/11
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 基于 lamp 技术 小条实蝇属 farq 复合体 鉴定 方法 及其 专用 引物
【权利要求书】:

1.用于辅助检测小条实蝇属FARQ复合体的成套引物组,由引物1-引物4组成;

所述引物1为序列表中序列1所示的单链DNA分子;

所述引物2为序列表中序列2所示的单链DNA分子;

所述引物3为序列表中序列3所示的单链DNA分子;

所述引物4为序列表中序列4所示的单链DNA分子;

所述小条实蝇属FARQ复合体由腹斑小条实蝇Ceratitis fasciventris、番荔枝实蝇Ceratitis anonae、纳塔尔实蝇Ceratitis rosa和瞿氏小条实蝇Ceratitis quilicii组成。

2.根据权利要求1所述的成套引物组,其特征在于:所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4的摩尔比为1:1:8:8。

3.权利要求1或2所述的成套引物组在如下b1)或b2)中的应用:

b1)制备用于辅助检测小条实蝇属FARQ复合体的产品;

b2)辅助检测小条实蝇属FARQ复合体;

所述小条实蝇属FARQ复合体由腹斑小条实蝇Ceratitis fasciventris、番荔枝实蝇Ceratitis anonae、纳塔尔实蝇Ceratitis rosa和瞿氏小条实蝇Ceratitis quilicii组成。

4.含有权利要求1或2所述成套引物组的试剂盒;

所述试剂盒的功能为辅助检测小条实蝇属FARQ复合体;

所述小条实蝇属FARQ复合体由腹斑小条实蝇Ceratitis fasciventris、番荔枝实蝇Ceratitis anonae、纳塔尔实蝇Ceratitis rosa和瞿氏小条实蝇Ceratitis quilicii组成。

5.一种辅助检测待测实蝇是否属于小条实蝇属FARQ复合体的方法,包括如下步骤:提取待测实蝇的核酸,以待测实蝇核酸为模板,采用权利要求1所述的成套引物组进行环介导等温扩增;环介导等温扩增反应结束后通过检测反应产物电泳后是否呈现阶梯状条带判断待测实蝇是否属于小条实蝇属FARQ复合体:若反应产物电泳后呈现阶梯状条带,则待测实蝇属于或候选属于小条实蝇属FARQ复合体;若反应产物电泳后无阶梯状条带,则待测实蝇不属于或候选不属于小条实蝇属FARQ复合体;

所述小条实蝇属FARQ复合体由腹斑小条实蝇Ceratitis fasciventris、番荔枝实蝇Ceratitis anonae、纳塔尔实蝇Ceratitis rosa和瞿氏小条实蝇Ceratitis quilicii组成。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述引物1和所述引物2在反应体系中的终浓度均为0.2μM,所述引物3和所述引物4在反应体系中的终浓度均为1.6μM;

或,所述环介导等温扩增的反应条件如下:65℃反应40min。

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