[发明专利]一种多指标快速检测荧光免疫层析试剂盒

说明书

本发明涉及一种多指标快速检测荧光免疫层析试剂盒，该试剂盒包含检测卡中的荧光垫上涂覆有荧光微球标记抗体的涂层，所述的抗体为C‑反应蛋白、髓过氧化物酶和心脏脂肪酸结合蛋白的单克隆抗体；本发明优化了活化剂配比等参数，实现上述三标志物同时更灵敏、更快捷、更准确检测的需求。

技术领域

本发明涉及生物技术检测领域，具体涉及一种同时检测3个标志物的检测更快捷、更方便的荧光免疫层析试剂盒。

背景技术

荧光免疫层析法检测试剂属于POCT类(point-of-care testing，即时检测或床旁检测) 检测产品，因具有检测方便、快捷、综合成本低等特点，在临床上得到广泛应用。然而，人体的复杂性决定了单一生物标记物难以及时、准确地全面反映受试者身体状况，往往需要同时进行多项检测，再综合判断。门诊量大是我国医疗卫生系统的一大特点，也是产生医患矛盾的一个诱因，无论是医生还是辅助部门都面临很大的工作压力。将多个标记物联合到一个试剂盒中检测，无疑会减少很多重复劳动，大大提高检验效率，从而加快临床医生的诊治效率。

多指标联合检测不但有助于缓解医患矛盾，更有利于保护患者的生命健康。尤其是在心血管疾病领域，心梗、脑梗这类急重症死亡率及致残率均超过40％，严重威胁患者生命安全，给其家庭乃至社会都带来巨大的经济负担和精神痛苦。如何在急症发生前尽快诊断出患者的发病风险，从而采取有效救治措施是减少、甚至避免悲剧发生的关键。多指标联合检测试剂盒是提高临床诊疗效率及患者预后水平的得力助手，但同时检测多个标记物在技术上存在一定难度，不同标记物的性质特点都不同，适用于不同的体系，相互之间会形成干扰，尤其是灵敏度更高的荧光法检测试剂盒。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，目前心血管疾病领域缺乏具有更高灵敏度及准确性且具有早期预警方面功能的多指标联合检测产品。

为解决以上技术问题，本发明提供一种可以在保证灵敏度及准确性的情况下，同时检测出血液中的C-反应蛋白、髓过氧化物酶和心脏脂肪酸结合蛋白三个标记物的荧光免疫层析检测试剂盒，具体技术方案如下：

本发明所述荧光免疫层析试剂盒包含检测卡，该检测卡包括样品垫、荧光垫、具有检测线和质控线的检测垫、吸样垫及底板。其中，所述荧光垫上涂覆有荧光微球标记抗体的涂层，所述的抗体为C-反应蛋白、髓过氧化物酶和心脏脂肪酸结合蛋白的单克隆抗体；该抗体标记过程中所用的活化剂为EDC和NHS，荧光微球与两活化剂的用量比为1: (14-16):(14-16)；所述的检测线有3条，分别为能够与所述涂层中荧光微球标记抗体特异性结合的配对抗体或抗原形成的涂层。

所述的检测卡还包括疏水性外壳，该外壳上设有加样孔及检视窗。所述的样品垫、荧光垫、检测垫、吸样垫和底板组成的试纸条固定在该外壳内。所述的加样孔位于所述样品垫上方，所述检视窗位于所述检测垫上方。

上述的C-反应蛋白(CRP)和髓过氧化物酶(MPO)均是心脑血管疾病的预警标志物，可以通过其含量变化来评估发生心脑血管急重症的风险。所述的心脏脂肪酸结合蛋白(hFABP)是特异性强且灵敏度很高的心肌损伤标记物，可以在无症状或轻微心绞痛症状时检测出心肌损伤状况。该三标记物联合检测，可以更为快捷、更为准确的评价受试者发生心梗等恶性事件的风险，为治疗争取了宝贵时间。

荧光免疫层析检测产品的原理及其结构为公知技术，实现对不同检测对象的检测主要是通过调整工艺部分实现，其中以试剂种类、浓度、pH值、配比等参数的选择尤为重要，由于工艺步骤和涉及试剂繁多，所以工艺筛选优化的工作很难通过一一实践的方法得到，而是需要对实验方案及其结果进行深入分析并在此基础上进行尝试摸索。尤其是多指标同时检测的产品，标记物抗体的性质差异使其具有各自事宜的缓冲系统、用量配比。实现三者间互不干扰且准确检测出其含量，是无法依据常用单个指标检测产品的技术简单调整，或有限次尝试完成的。化学物质间的相互作用还有很多是我们目前科技所不了解的，试验过程中经常会出现理论可行，但结果不理想的状况。