[发明专利]一种荧光假单孢杆菌发酵培养基、培养方法与应用

说明书

本发明涉及微生物技术领域，具体公开了一种荧光假单孢杆菌发酵培养基、培养方法与应用。本发明的荧光假单孢杆菌发酵培养基中包含尿素及钼酸钠，所述钼酸钠与所述尿素的质量比为(1‑5)：(10‑30)。此外，还以葡萄糖、甘油和大豆油为碳源，以玉米浆为氮源，并包括：氯化钠、亮氨酸、碳酸钙和消泡剂。以该培养基进行荧光假单孢杆菌的发酵培养，可显著提高荧光假单孢杆菌的细胞活性，且使得莫匹罗星的发酵产量有了明显的提高。此外，本发明培养方法成本低，培养发酵工艺简便，利用推广应用，适于工业化生产莫匹罗星。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体地说，涉及一种荧光假单孢杆菌发酵培养基、培养方法与应用。

背景技术

莫匹罗星(Mupirocin)是由荧光假单孢杆菌(Pseudomonas fluorescens)发酵产生。其作用机制是抑制细菌异亮氨酸-转运核糖核酸合成酶的第一步氨基酰化反应，即抑制异亮氨酰腺苷酸的生物合成，从而导致转运核糖核酸的缺失。

莫匹罗星在需氧革兰阳性球菌上会产生很好的抗菌活性，特别是对于能感染皮肤的表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和化脓性链球菌，对一些革兰氏阴性菌如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟氏球菌同样具有生长抑制作用。莫匹罗星在临床应用的范围逐步拓展，且其副作用较小，经济实惠，因此，在浅层皮肤细菌抗感染的治疗方面，此产品已经成为最佳的治疗药物之一，具有广泛的市场发展前景。

目前莫匹罗星的生产方法主要是生物发酵方法，但是目前荧光假单孢杆菌的生产能力仍有待进一步提高。尤其是在工业化扩大生产中，如何在保证生产成本低的情况下，获得更佳的生产效率，仍是需要进一步摸索解决的问题。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种可有效提升荧光假单孢杆菌活性和莫匹罗星产量的培养基。

为了实现该目的，本发明的技术方案如下：

一种荧光假单孢杆菌发酵培养基，所述发酵培养基中包含钼酸钠及尿素，所述钼酸钠与所述尿素的质量比为(1-5)：(10-30)。

本发明发现，当在培养荧光假单孢杆菌时加入钼酸钠及尿素，并将两者以特定质量比组合后，可使得该菌的细胞活性有明显的提高，并进一步提高发酵效价，使得莫匹罗星的产量得以提升。

本发明中，所述钼酸钠与所述尿素的质量比为(1-3)：(14-16)，优选为2:15，以获得更好地协同提升发酵效价的效果。

本发明中，所述钼酸钠的添加量为所述发酵培养基重量的0.01％—0.1％，优选为0.01％—0.05％，更优选为0.02％。

本发明中，尿素的添加量为所述发酵培养基重量的0.1％-1％，优选为0.1％—0.3％，更优选为0.15％，以既能节约生产成本又能有效提高效价。

本发明中，以葡萄糖、甘油和大豆油为碳源，还以玉米浆为氮源，且所述的发酵培养基还包括：氯化钠、亮氨酸、碳酸钙和消泡剂。

本发明的培养基可更好地配合钼酸钠和尿酸，共同发挥促进荧光假单孢杆菌活性和生产效率的作用。

本发明中，以质量百分比计包括：葡萄糖：1.5-2.5％，甘油：0.4-0.6％，氯化钠：0.3-0.5％，玉米浆：0.3-0.5％，亮氨酸0.08-0.12％，碳酸钙：0.25-0.35％，大豆油：0.8-1.2％，泡敌：0.015-0.025％。

优选以质量百分比计包括：葡萄糖：2％，甘油：0.5％，氯化钠：0.4％，玉米浆：0.4％，亮氨酸0.1％，碳酸钙：0.3％，大豆油：1％，泡敌：0.02％。

本发明进一步优选的发酵培养基以质量百分比计包括：钼酸钠0.02％，尿素0.15％，葡萄糖：2％，甘油：0.5％，氯化钠：0.4％，玉米浆：0.4％，亮氨酸0.1％，碳酸钙：0.3％，大豆油：1％，泡敌：0.02％，余量为水。