[发明专利]一种简易观察葡萄茎水分通道走向与分布的实验方法

说明书

一种简易观察葡萄茎水分通道走向与分布的实验方法，属于葡萄栽培技术领域。本发明利用染色与透明技术，选取适宜的染色剂和恰当的透明方法，使得葡萄茎水分运输通道可肉眼观察，为人们从宏观上观察植物水分运输途径、动态和走向提供了有效的实验方法，也为生产上了解葡萄水分吸收与利用规律提供了一套简单易操作且有效的方法。

技术领域

本发明涉及一种简易观察葡萄茎水分通道走向与分布的实验方法，属于葡萄栽培技术领域。

背景技术

水分是植物生长发育的必需物质，同时也是各种营养物质运输的媒介。植物中水分运输研究一直是植物生理学研究中的热点。葡萄作为一种常见的果树树种，也是果树学中研究水分运输的模式植物。葡萄茎是树体水分和养分运输的主要通道场所，观察水分在茎内运输通道是研究植物水分利用效率常常涉及到的一项重要实验内容。

人们通常利用光学显微镜和电子显微镜从微观上观察葡萄茎水分运输的通道，这些技术依赖于前期的切片处理，技术性强，切片程序复杂，同时由于水分是无色液体，葡萄茎水分运输的通道位于不透明的茎皮层以内，无法从宏观上用肉眼到水分运输途径和实时运输状态。如何从宏观上观察葡萄茎水分通道走向与分布成为果树解剖学研究上的一道难题。

发明内容

本发明的目的是针对上述现有技术的不足，提供一种简易且有效的观察葡萄茎水分运输通道走向与分布的实验方法，通过选择适宜的染色剂和恰当的浓度，使得茎中的水分运输通道在不利用常规切片处理和显微镜观察能够肉眼可观察，同时可以用来研究葡萄茎中水分运输走向和分布规律。

本发明的技术方案如下：

一种简易观察葡萄茎水分通道走向与分布的实验方法，其特征是，包括以下步骤：

1）染色剂的选择

根据葡萄茎木质部水分运输的特点，采用酸性品红作为水分运输通道染色试剂；

2）染色剂的引入

采用活体引入法，在葡萄生长季节，在茎基部斜切一刀，立即用防水铝箔胶带在切口下部缠绕成漏斗状，将酸性品红染色剂溶液加入到铝箔胶带形成的漏斗中，根据染色剂溶液吸收情况及时添加染色剂溶液；

3）取样

通过叶片颜色变化观察到染色剂在茎中的运输位置，根据观察要求，确定取样时间；取样时将茎在切口上方剪取，立即将茎放入冰盒，带回实验室观察处理；

4）观察

根据茎的不同部位采取不同的实验方法进行观察；其中茎中水分运输途径观察可直接剥去葡萄茎的皮层进行观察，采用横切或者纵切方式，观察茎中染色剂在茎中的分布与走向。

横切观察：先将茎切成5cm小段，然后用保安单面刀片横切，切片厚度1-2mm，且切片厚度均匀，观察茎水分运输通道横切面分布；纵切观察：先将茎切成5cm小段，在茎段切面1/2处纵切，观察水分运输通道在茎中的纵向分布。

进一步地，所述步骤1）中，将酸性品红配制成质量浓度为2%的水溶液，得到茎的水分运输通道的染色剂溶液。

进一步地，所述步骤2）中，在葡萄生长季节，选择在天气晴朗的上午进行，在茎基部斜切一刀，深度为茎粗度的1/2，立即用宽48mm的防水铝箔胶带切口下部1.0cm处开始缠绕，成漏斗状，将15ml的酸性品红染色剂溶液加入到铝箔胶带形成的漏斗中，根据染色剂溶液吸收情况及时添加染色剂溶液，每次添加5-10ml。

进一步地，所述步骤3）中，取样时将茎在切口上方0.5cm处剪取。

进一步地，叶柄与皮层中的水分运输途径观察，由于叶柄较细、茎皮层较薄，无法准确进行徒手切取到水分运输的途径，故采取透明方法进行处理，具体过程如下：

1）叶柄切取成小段，茎皮层切取成小段；