[发明专利]一种简易观察葡萄茎水分通道走向与分布的实验方法

权利要求书

1.一种简易观察葡萄茎水分通道走向与分布的实验方法，其特征是，包括以下步骤：

1）染色剂的选择

根据葡萄茎木质部水分运输的特点，采用酸性品红作为水分运输通道染色剂；

2）染色剂的引入

采用活体引入法，在葡萄生长季节，在茎基部斜切一刀，立即用防水铝箔胶带在切口下部缠绕成漏斗状，将酸性品红染色剂溶液加入到铝箔胶带形成的漏斗中，根据染色剂溶液吸收情况及时添加染色剂溶液；

3）取样

通过叶片颜色变化观察到染色剂在茎中的运输位置，根据观察要求，确定取样时间；取样时将茎在切口上方剪取，立即将茎放入冰盒，带回实验室观察处理；

4）观察

根据茎的不同部位采取不同的实验方法进行观察；其中茎中水分运输通道观察可直接剥去葡萄茎的皮层进行观察，采用横切或者纵切方式，观察茎中染色剂在茎中的分布与走向。

2.根据权利要求1所述的一种简易观察葡萄茎水分运输通道走向与分布的实验方法，其特征是，所述步骤1）中，将酸性品红配制成质量浓度为2%的水溶液，得到茎的水分运输通道的染色剂溶液。

3.根据权利要求1所述的一种简易观察葡萄茎水分运输通道走向与分布的实验方法，其特征是，所述步骤2）中，在葡萄生长季节，选择在天气晴朗的上午进行，在茎基部斜切一刀，深度为茎粗度的1/2，立即用宽48mm的防水铝箔胶带切口下部1.0cm处开始缠绕，成漏斗状，将15ml的酸性品红染色剂溶液加入到铝箔胶带形成的漏斗中，根据染色剂溶液吸收情况及时添加染色剂溶液，每次添加5-10ml。

4.根据权利要求1所述的一种简易观察葡萄茎水分运输通道走向与分布的实验方法，其特征是，所述步骤3）中，取样时将茎在切口上方0.5cm处剪取。

5.根据权利要求1所述的一种简易观察葡萄茎水分运输通道走向与分布的实验方法，其特征是，叶柄与皮层中的水分运输通道观察，由于叶柄较细、茎皮层较薄，无法准确进行徒手切取到水分运输的通道，故采取透明方法进行处理，具体过程如下：

1）叶柄切取成小段，茎皮层切取成小段；

2）用NaOH溶液处理，直到没有色素析出；

3）用去离子水冲洗，将NaOH溶液清洗干净，移入水合氯醛饱和溶液继续处理，直到材料透明；

4）用去离子水冲洗，然后在去离子水中保存12小时，去除残留的水合氯醛；

5）将透明后的材料放在常规玻璃显微镜载玻片或薄玻璃片上，用体式显微镜或显微镜进行观察。

6.根据权利要求5所述的一种简易观察葡萄茎水分运输通道走向与分布的实验方法，其特征是，叶柄与皮层中的水分运输通道观察过程中，具体参数为：

1）叶柄切取成1cm长的小段，茎皮层切取成1cm长，1cm宽的小段；

2）用质量浓度为5%NaOH的溶液在37℃处理7天，直到没有色素析出；

3）用去离子水冲洗3-5次，将NaOH溶液清洗干净，移入水合氯醛饱和溶液继续处理，直到材料透明；4）用去离子水冲洗3次，每次冲洗15分钟，然后在去离子水中保存12小时，去除残留的水合氯醛；

5）将透明后的材料放在常规玻璃显微镜载玻片或薄玻璃片上，用体式显微镜或显微镜进行观察。

7.根据权利要求6所述的一种简易观察葡萄茎水分运输通道走向与分布的实验方法，其特征是，叶片观察，叶片透明方法可参考叶柄透明方法，但在透明过程中叶片由于太薄，透明时间过长容易破碎，因此在透明过程尽量缩短透明时间，可根据叶龄确定透明时间，通常幼嫩叶采用质量浓度为5%NaOH溶液，透明时间2天，水合氯醛透明时间12小时，成熟叶片采用质量浓度为5%NaOH溶液，透明时间5天，水合氯醛透明时间在1天，观察方法同叶柄。