[发明专利]基于内源激素提高马尾松生根能力的方法

说明书

本发明涉及组培生物技术领域，特别涉及基于内源激素提高马尾松生根能力的方法，本发明通过设定IAA/GAs的比值；对马尾松继代芽进行分型，通过分型选择不同继代芽的生根剂，实现了生根剂的精准添加，该方法有效提高了马尾松继代芽的生根能力，经过上述方法，能快速筛选出符合继代芽生长条件的生根剂，有效提高了马尾松继代芽的生根能力，为加快马尾松优良无性系繁育与利用，提供有力的科技支撑。

【技术领域】

本发明涉及组培生物技术领域，特别涉及一种基于内源激素提高马尾松生根能力的方法。

【背景技术】

马尾松(Pinus massoniana)是我国亚热带地区特有乡土造林脂材两用树种。作为一种综合利用价值高、推广前景广阔的树种，马尾松不仅可用来生产三板、造纸及化纤工业制造，还可用来生产松香、松节油等工业原料。由于马尾松种源、家系遗传分化差异较大，南方马尾松人工林生产力普遍不高，严重制约了马尾松产业的快速发展。通过无性快繁技术进行无性系育林，是实现马尾松人工林集约高效定向培育的重要途径。申请人目前，通过外植体诱导复幼，建立了15～30年生马尾松优树茎芽组织培养技术，首次实现了马尾松成年植株的离体再生。众所周知，继代培养是进行外植体驯化，提升繁殖效率，实现大规模组培苗生产的前提与保障。然而，大量研究表明，在植物长期继代培养中，营养体出现退化，生理活性变差，再生繁殖能力减弱。自2014年以来，申请人先后建立了257个马尾松基因型无菌繁殖体系，在持续性的研究观察中，发现经继代15～20次(1.5～2年)后，继代芽繁殖效率高，生根效果稳定，而继代时间达4年左右时，继代芽生根困难，生根率、根条数明显下降，植株再生效率低，阻碍了马尾松无性系育苗工厂化。从以往研究来看，继代数与植物激素是导致继代培养中植株再生效率变化差异较大的重要因素。

本申请通过探讨马尾松长期继代培养中继代芽生根能力和内源激素含量的变化，分析马尾松继代芽生根能力与内源激素的相关性；申请人发现内源激素相关性可做为判断生根剂添加量和选择组合的标准，根据这一标准，有效改善了生根剂的添加方式，使得生根剂添加更为精准，为加快马尾松优良无性系繁育与利用提供有力的科技支撑。

【发明内容】

鉴于上述内容，有必要提供一种精准、快速、科学的生根剂添加方法，该方法能有效提高马尾松继代芽的生根能力。

为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：

基于内源激素提高植物生根能力的方法，所述方法为测定植物继代芽的内源激素：IAA和GAs含量；计算出IAA/GAs的比值，根据IAA/GAs的比值对继代芽进行分型，当7≤IAA/GAs≤8，将继代芽分为第一继代芽；当IAA/GAs＞8时，将继代芽分为第二继代芽；当IAA/GAs＜7时，将继代芽分为第三继代芽；根据上述分型选择不同的生根剂。

进一步的，所述第一继代芽的生根剂为IAA；第二继代芽的生根剂为NAA；第三继代芽的生根剂为IAA和PAC。

进一步的，所述第一继代芽的生根剂为3-4μM的IAA；第二继代芽的生根剂为1-1.5μM的NAA；第三继代芽的生根剂为2-4μM的IAA和4-6μM的PAC。

进一步的，所述生根剂由不同浓度的ABA、CPPU和iP组成。

进一步的，所述生根剂组成如下：第一继代芽的生根剂由2-4μM的ABA、2-4μM的CPPU和3-5μM的iP组成；第二继代芽的生根剂由8-12μM的ABA、0.4-0.8μM的CPPU和1-2μM的iP组成；第三继代芽的生根剂由15-30μM的ABA、0.4-0.8μM的CPPU和0.5-1.0μM的iP组成。

进一步的，所述第一继代芽的继代次数为1-10次；第二继代芽的继代次数为11-20次；第三继代芽的继代次数为21-40次。

进一步的，所述植物为马尾松。

进一步的，所述马尾松种源为桐棉松；其采用嫁接的方式获得外植体。