[发明专利]一种卡利普多人工抗原及其多抗和应用有效
申请号: | 202010717800.0 | 申请日: | 2020-07-23 |
公开(公告)号: | CN112142838B | 公开(公告)日: | 2021-11-16 |
发明(设计)人: | 谢清;吴银飞 | 申请(专利权)人: | 杭州傲锐生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/765 | 分类号: | C07K14/765;C07K1/107;C07K1/02;C07K16/44;C07K16/06;C07K1/22;C07K1/36;C07K1/34;G01N33/68;G01N33/558 |
代理公司: | 杭州君度专利代理事务所(特殊普通合伙) 33240 | 代理人: | 朱亚冠 |
地址: | 311121 浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 卡利普多 人工 抗原 及其 多抗 应用 | ||
1.一种抗卡利普多多克隆抗体,其特征在于通过采集免疫卡利普多人工抗原KAL-BSA的动物血清,再通过两步亲和层析法获得;其中所述的两步亲和层析法采用的亲和层是偶联BSA大分子的亲和柱以及偶联BGG大分子的亲和柱;
所述卡利普多人工抗原KAL-BSA,是对卡利普多进行化学修饰,偶联牛血清白蛋白BSA获得能诱导B细胞的增殖和分化继而产生特异性抗体的人工抗原。
2.一种抗卡利普多多克隆抗体的合成方法,其特征在于该方法包括以下步骤:
步骤(1)、将卡利普多人工抗原KAL-BSA稀释,与佐剂混合后对动物进行多次免疫;所述卡利普多人工抗原KAL-BSA,是对卡利普多进行化学修饰,偶联牛血清白蛋白BSA获得能诱导B细胞的增殖和分化继而产生特异性抗体的人工抗原;
步骤(2)、采集免疫动物的血清,用硫酸铵纯化后获得抗体半成品;
步骤(3)、将获得的抗体半成品依次过偶联BSA大分子的亲和柱以及偶联BGG大分子的亲和柱;收集流穿液,浓缩后透析多次。
3.如权利要求2所述的一种抗卡利普多多克隆抗体的合成方法,其特征在于偶联BSA大分子的亲和柱以及偶联BGG大分子的亲和柱的制备工艺具体是将100mlGE-Sepharose-4B填充胶用溴化氢活化,然后等量分成两份;分别将BSA和BGG蛋白溶于pH=9.6 0.01M碳酸盐缓冲液,立刻加入到活化好的填充胶中,搅拌均匀后过夜;然后用乙醇胺封闭,0.01M PBS冲洗平衡。
4.如权利要求1所述的一种抗卡利普多多克隆抗体在制备卡利普多检测试剂盒中的应用。
5.如权利要求1所述的一种抗卡利普多多克隆抗体在制备检测卡利普多的试纸条中的应用。
6.如权利要求4或5所述的应用,其特征在于检测阈值达到100ng/ml。
7.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述的用于检测卡利普多的试纸条,包括样品垫、标记物垫、反应膜和吸样垫;所述标记物垫包被有胶体金标记的抗卡利普多多克隆抗体,所述反应膜的检测线处包被有卡利普多-牛血清白蛋白复合物,所述反应膜的质控线处包被有二抗。
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