[发明专利]pH响应性丝胶蛋白-阿霉素纳米药物载体的构建方法

说明书

本发明公开了一种pH响应性丝胶蛋白‑阿霉素纳米药物载体的构建方法的制备方法，制备方法主要步骤为：（1）ZIF‑8的制备及阿霉素药物的负载及丝胶蛋白的修饰，（2）ZIF‑8@DOX@SS的水洗提纯。将所得的药物命名为ZIF‑8@DOX@SS。所得的无机纳米颗粒可在水中形成分布均匀的纳米颗粒水溶液，具有高稳定性、低毒副作用、良好的药物控释等优势，有效解决了疏水药物分子溶解度低的问题，提供了一种高效的药物输送系统。

技术领域

本发明为药物递送领域，具体涉及到一种pH响应性丝胶蛋白-阿霉素纳米药物载体的构建方法。

背景技术

丝胶蛋白是一种从蚕丝中提取的亲水性糖蛋白，由18种氨基酸组成，包括丝氨酸、甘氨酸、谷氨基酸等多种人体所需氨基酸。其化学元素组成为：碳（46.5%）、氧（31%）、氮（16.5%）、氢（6%）。经研究，丝胶呈现出良好的抗炎、抗菌、抗氧化等多种效能。沸石咪唑酯骨架-8（ZIF-8）是最常用的MOF，用于pH响应性药物释放。它具有方钠石（SOD）型结构，具有大孔（11.6Å），并且由于其孔隙率和酸敏感性，显示出改善的药物负载能力和pH响应性药物释放。

由于阿霉素药物分子尺寸较小且水中溶解度极低，因此在药物递送过程中面临非特异选择性、药物利用率较低、肾清除率较高以及毒副作用较强等问题亟待解决，因此提高其水溶性和提高其生物相容性具有重要的科学意义。通过在ZIF-8上负载阿霉素药物，利用丝胶蛋白在药物外围形成包裹，当纳米颗粒到达肿瘤微环境时，药物从载体上释放，发挥药效。这种载药体系增加了药物的稳定性和生物相容性，在水中形成纳米溶液还显示出良好的细胞通透和滞留效应（EPR），使肿瘤细胞对药物的摄取大大增加，与此同时，解决了阿霉素本身所存在的对正常集体组织毒副作用大等缺点，实现了载药粒子的靶向性和优良的可控释放。

发明内容

针对现有无机纳米粒子选择性较差，药物上载量偏低，也难以保证药物的选择性可控释放等缺陷，本发明旨在提供一类pH响应性丝胶蛋白-阿霉素纳米药物载体的构建方法及其在药物治疗癌症领域的应用。

本发明的技术方案具体如下：

一种pH响应性丝胶蛋白-阿霉素纳米药物载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将丝胶蛋白粉末溶于去离子水中，利用涡旋仪将丝胶蛋白充分溶解；将所得丝胶蛋白溶液静置5分钟，取上清液待用；

（2）将盐酸阿霉素溶于去离子水中，得到盐酸阿霉素水溶液；

（3）将（1）和（2）所得的丝胶蛋白水溶液和盐酸阿霉素水溶液混合，并在室温下搅拌5分钟待用；

（4）将（3）所得的盐酸阿霉素及丝胶蛋白混合溶液中加入咪唑-2-吡咯甲醛，继续在室温下搅拌15分钟后加入六水硝酸锌；

（5）将（4）所得的溶液在室温下避光搅拌过夜；

（6）将反应完全的溶液离心，取沉淀物；将沉淀物溶于去离子水中，再次离心取沉淀物，进行三次水洗后得到ZIF-8@DOX@SS纳米颗粒水溶液。

进一步，所述步骤（1）中丝胶蛋白的质量浓度范围为 30-45 mg/ml。

进一步，所述步骤 （2）中盐酸阿霉素的质量浓度范围为0.3-0.6 mg/ml。

进一步，所述步骤（3）中控制阿霉素与丝胶蛋白的质量比为1：150。

进一步，所述步骤（4）中咪唑-2-吡咯甲醛与六水硝酸锌的质量比为54：25。

进一步，所述步骤（5）中避光搅拌过夜时间为12~16小时。

进一步，所述步骤（6）中离心速度为8000转/分钟，ZIF-8@DOX@SS纳米颗粒的直径为120~300 nm。

本发明的主要优点在于：