[发明专利]马齿苋多糖与顺铂复合物的制备及其协同抗肿瘤活性研究

说明书

本发明公开了一种马齿苋多糖与顺铂复合物的制备及其协同抗肿瘤活性研究，发明中涉及马齿苋多糖（POP）作为主链，高碘酸钠（NaIO₄），阿仑膦酸钠（ALN），通过选择性氧化、席夫碱反应制得马齿苋多糖‑阿仑膦酸钠偶联物，最后马齿苋多糖‑阿仑膦酸钠（POP‑ALN）偶联物和顺铂的配合物共价键合制得最终产物（POP‑ALN‑CIS‑Pt），通过MTT法测定细胞半致死数（IC₅₀），细胞免疫荧光染色法测定其免疫作用，本发明制备的POP‑ALN‑CIS‑Pt偶联物合成条件温和，制备过程容易重复，能抑制宫颈癌细胞的生长，对其还有免疫调节作用，在肿瘤协同治疗中具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于抗癌药物制备技术领域，涉及一种马齿苋多糖与顺铂复合物的制备及其协同抗肿瘤活性研究。

背景技术

近年来癌症依然是危害人类生命和健康最严重的疾病之一，且恶性肿瘤的发病死亡率均呈持续上升态势，化学药物疗法是目前肿瘤治疗的主要手段之一，与其它的治疗方案相比，化疗是一种全身性的治疗方案且能够最大程度地杀死肿瘤细胞，因此，化疗在抗肿瘤治疗中占有非常重要的比重，常规的化疗药物具有明显的毒副作用，所以新的治疗方案被不断发现和改进，比如，化学治疗和免疫治疗相结合是利用机体自身的免疫系统增强药物的抗肿瘤效果，还可以降低毒副作用，铂类的化疗药物毒副作用比较严重，限制其临床应用，因此，以多糖为载体合成低毒性的多糖复合物受到关注。

多糖作为生物大分子，具有稳定、低毒、良好的生物相容性和生物降解性和可以修饰的化学基团等优点，作为载体材料进行功能化修饰，制备复合的多糖药物，马齿苋是一年生的植物，拥有悠久的入药与食用历史，属于传统中药，能清热解毒，可用作退烧药、杀菌剂等，马齿苋多糖（purslane polysaccharide，POP）是从马齿苋中提取的主要有效成分，属于活性多糖中植物多糖的一种，具有多种生物活性，如增强免疫力、抗氧化、抗癌等生物活性，研究发现，两种不同分子量的马齿苋多糖都具有抗肿瘤活性和增强免疫力的作用，所以，协同治疗药物用于癌症治疗更受到青睐，因此，构造新的含铂金属药物，提高抗肿瘤治疗效果，以马齿苋多糖为主链，通过功能化修饰共价键和制成多糖复合药物，在联合治疗肿瘤方面有着广阔的应用前景。

发明内容

为解决上述问题，本发明将马齿苋多糖、阿仑膦酸钠和顺铂结合，设计制备了一种马齿苋多糖与顺铂复合物并研究抗肿瘤活性和免疫活性。

马齿苋多糖与顺铂复合物的制备及其协同抗肿瘤活性研究，其特征在于该方法包括步骤如下：

步骤1，按照马齿苋多糖与高碘酸钠的质量比为1:（1~1.5）各自溶解在水溶液中，在反应温度为25~50℃及磁力搅拌器下搅拌25~50h的情况下，溶液的颜色逐渐由红棕色变为浅黄色，反应充分后，透析得到含醛基的马齿苋多糖；

步骤2，测定马齿苋多糖中醛基的含量，按照醛基与阿仑膦酸钠的物质的量比为1:1（0.5g:0.623g）分别溶于HAc/NaAc（pH=4~6）缓冲溶液中，反应温度为25~50℃，搅拌48h，透析得到POP-ALN偶联物，然后冷冻真空干燥；

步骤3，将180mg的马齿苋多糖-阿仑膦酸钠偶联物和45mg的顺铂配合物混合，在温度范围为25~40℃，搅拌反应48h，透析冷冻干燥得POP-ALN-CIS-Pt偶联物，制备过程以式一所示：

式一

POP-ALN-CIS-Pt偶联物抗肿瘤活性和免疫活性研究方法如下：