[发明专利]一种灵芝水溶性蛋白酶解制备低聚肽的方法

说明书

本发明公开了一种灵芝水溶性蛋白酶解制备低聚肽的方法，其特征在于，将灵芝粉加入到蒸馏水中提取，得到灵芝蛋白提取液；将灵芝蛋白提取液离心，取上清液，经过滤、浓缩和冷冻干燥得水溶性灵芝蛋白；在灵芝蛋白中加入双酶进行酶解，将所得酶解液进行灭活，得到灭活液；将灭活液依次进行离心和膜分离，浓缩、干燥，得到灵芝蛋白低聚肽。本发明制备的低聚肽具有良好的溶解性和稳定性，保质期长，容易被皮肤和人体吸收，具有较高的营养价值和生物活性，可用于食品和化妆品领域。

技术领域

本发明涉及一种灵芝水溶性蛋白酶解制备低聚肽的方法，属于多肽制备技术领域。

背景技术

灵芝属于担子菌纲多孔菌目灵芝科，是一种珍贵的药用真菌，在古代享有“仙草”、“还魂草”的美誉。灵芝的生物活性物质十分丰富，现在已分离得到两百多种化合物。主要是多糖类、核苷类、生物碱类、氨基酸蛋白类、三萜类等。灵芝蛋白类是一类重要的活性物质，其具有延缓衰老、抗氧化，提高人体机能、改善内脏微循环的作用。

灵芝水溶性蛋白由于其与人体皮肤具有良好的相容性，而受到研究者们的广泛关注。低聚肽是以灵芝为原料经过水提得到水溶性蛋白，再通过双酶解所得。低聚肽一般由2到10个氨基酸组成，在人体内不需要消化可以直接吸收，具有很高的生物活性，它能促进细胞分裂，增强细胞新陈代谢，修复人体各种受损、病变细胞。其应用于化妆品中可以起到清除自由基、延缓皮肤衰老、美白、保湿等作用。随着人们对美的追求和护肤意识的不断增强，低聚肽的提取制备越来越成为了研究的热点。而现有的技术大多制备的低聚肽存在纯度低、不稳定、易分解、难保存、不易吸收等缺点。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：现有技术制备的低聚肽存在纯度低、不稳定、易分解、难保存、不易吸收等问题。

为了解决上述问题，本发明提供了以下技术方案：

一种灵芝水溶性蛋白酶解制备低聚肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1)：将采购的灵芝子实体清洗后，烘干；

步骤2)：将干燥后的灵芝子实体置于粉碎机中粉碎，过筛，得到灵芝粉；

步骤3)：将灵芝粉加入到蒸馏水中提取，得到灵芝蛋白提取液；

步骤4)：将灵芝蛋白提取液离心，取上清液，经过滤、浓缩和冷冻干燥得水溶性灵芝蛋白；

步骤5)：在灵芝蛋白中加入双酶进行酶解，将所得酶解液进行灭活，得到灭活液；

步骤6)：将灭活液依次进行离心和膜分离，浓缩、干燥，得到灵芝蛋白低聚肽。

优选地，所述步骤1)中烘干温度为50℃。

优选地，所述步骤2)中过筛的规格为30～50目。

优选地，所述步骤3)中灵芝粉与蒸馏水的质量比为1:(10～15)；提取温度为25～35℃，pH值为6～8，提取时间为7-10h。

优选地，所述步骤5)中加入的双酶为木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶。

更优选地，所述木瓜蛋白酶与碱性蛋白酶的质量比为2：(1～1.5)。

优选地，所述步骤5)中酶解的温度为50～60℃，时间为1.5～2.5h，pH值为6～8；灭活的温度为80～90℃，时间为15～20min。

优选地，所述步骤6)中离心的转速为4000～4500r/min，时间为10～15min。

优选地，所述步骤6)中的膜分离采用超滤；浓缩采用凝胶浓缩法；干燥采用冷冻干燥。

更优选地，所述凝胶浓缩法所采用的凝胶柱为SephadexG-25。