[发明专利]UPLC-MS/MS法测定海洛因成瘾大鼠和小鼠体内代谢物在体内的分布及其应用

权利要求书

1.UPLC-MS/MS法测定海洛因成瘾大鼠和小鼠体内代谢物在体内的分布，其特征在于，所述测定的方法包括：

S1分别精确称取海洛因、吗啡、去甲吗啡、O6-单乙酰吗啡标准品以甲醇溶解、定容，配制成质量浓度为1g/L的储备液，于4℃冰箱中保存；再分别吸取上述标准溶液1mL，准确定容至10mL，配制成质量浓度为100mg/L混合标准储备液；使用时用甲醇配制成质量浓度范围为2-200μg/L的混合标准工作液；

S2获得实验用的成年雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠(150-200g)和C57BL/6J小鼠；

S2将实验动物随机分为两组；将盐酸海洛因溶解在0.9％NaCl溶液中，给实验动物每天连续腹腔注射2次，每天逐量增加，连续21天；

S3随着海洛因剂量的增加，实验动物产生了生理依赖，包括跳跃、牙齿抖动、扭动、湿狗样抖、上睑下垂、齿颤、异常姿势症状；

S4分别对步骤S3的实验动物采集心脏、脑、肾脏、肺、肝、血液等组织样本。样本采集后置于-80℃超低温冷冻储存箱保存被检；

S5取等体重的样本，充分研磨，加入500μl乙腈，涡旋混匀，振荡10min，4000r/min离心10min，用0.45μm滤膜过滤后待测；

S6通过超高效液相色谱-串联质谱对样本进行检测；

S7获得检测结果，得出海洛因代谢物的体内分布。

2.根据权利要求1所述的UPLC-MS/MS法测定海洛因成瘾大鼠和小鼠体内代谢物在体内的分布，其特征在于，海洛因代谢物O6- 单乙酰吗啡在大鼠体内分布情况：心组织＞脑组织＞肺组织＞肾组织＞血液＞肝组织，在小鼠体内主要分布于血液、脑组织。

3.根据权利要求1所述的UPLC-MS/MS法测定海洛因成瘾大鼠和小鼠体内代谢物在体内的分布，其特征在于，吗啡在大鼠体内分布：肺组织＞肾组织＞肝组织＞心组织＞脑组织＞心血，在小鼠体内分布情况：肺组织＞肾组织＞心组织＞肝组织＞脑组织。

4.根据权利要求1所述的UPLC-MS/MS法测定海洛因成瘾大鼠和小鼠体内代谢物在体内的分布，其特征在于，而去甲吗啡在大鼠体内分布于肺、肝、肾，在小鼠体内分布较少，分布的情况：肺＞肝＞肾。

5.一种利用权利要求1所述的UPLC-MS/MS法测定海洛因成瘾大鼠和小鼠体内代谢物在体内的分布应用于滥用海洛因者进行检测排查。