[发明专利]一种用于皮肤保湿检测的蛋白芯片、其制备方法、其应用及其检测方法

权利要求书

1.一种用于皮肤保湿检测的蛋白芯片，其特征在于，包括检测玻片和固定在所述检测玻片上的抗体，所述抗体包含针对（Ⅰ）、（ⅠⅠ）、（ⅠⅠⅠ）、（Ⅳ）和（V）中靶点蛋白的特异性抗体：

（Ⅰ）Keratin 10、KRT1、SIRT1、FLG、LOR和INV；

（ⅠⅠ）TRPV4、Occludin、Claudin 1、DSG1、KLK5和PSMD14；

（ⅠⅠⅠ）AQP3；

（Ⅳ）CD44和SPAM1；

（V）ELONL1、ADIPOQ、PPAR-γ、TLR-2、TNF-a、IFN-γ、IL-6、IL-1β和MCP-1。

2.根据权利要求1所述的蛋白芯片，其特征在于，所述检测玻片还固定有对照抗体，所述对照抗体为生物素标记的牛IgG。

3.权利要求1或2所述的蛋白芯片在检测具有皮肤保湿功效的产品中的应用。

4.权利要求1或2任一项所述的蛋白芯片的制备方法，其特征在于，将所述抗体与抗体稀释液混合后点样至检测玻片上，静置过夜，干燥，得到蛋白芯片。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述抗体稀释液为含有0.1-1 mg/mL牛血清白蛋白的PBS缓冲液；所述抗体的点样浓度为0.00002-0.02 ng/pl。

6.利用权利要求1或2任一项所述的蛋白芯片检测产品保湿性能的方法，其特征在于，包括以下步骤：

对所述靶点蛋白的表达显著性进行评分，将各通路中靶点蛋白的评分带入以下公式，计算待测产品的总评分：

H_j=（∑_ih_i）/i

P=∑_jH_jK_j

其中，i为（Ⅰ）、（ⅠⅠ）、（ⅠⅠⅠ）、（Ⅳ）和（V）通路中靶点蛋白的个数，i=1,2,3…，h_i为每个通路中各靶点蛋白的评分；j=（Ⅰ）、（ⅠⅠ）、（ⅠⅠⅠ）、（Ⅳ）和（V）,H_j为（Ⅰ）、（ⅠⅠ）、（ⅠⅠⅠ）、（Ⅳ）和（V）通路中靶点蛋白的平均分，K_j为（Ⅰ）、（ⅠⅠ）、（ⅠⅠⅠ）、（Ⅳ）和（V）通路的权重系数。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述（Ⅰ）、（ⅠⅠ）、（ⅠⅠⅠ）、（Ⅳ）和（V）中靶点蛋白的平均分根据所述靶点蛋白与对照组的相关性进行评分，其中，极显著差异为2分，显著差异为1分，无变化为0分，分别获得（Ⅰ）、（ⅠⅠ）、（ⅠⅠⅠ）、（Ⅳ）和（V）的平均分H_j。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述（Ⅰ）、（ⅠⅠ）中靶蛋白的权重系数K_j为0.2-0.4，所述（ⅠⅠⅠ）、（Ⅳ）中靶蛋白的权重系数K_j为0.1-0.2，所述（V）中靶蛋白的权重系数K_j为 0.1-0. 3。