[发明专利]一种明日叶高效液相色谱指纹图谱的建立方法

说明书

本发明提供了一种明日叶高效液相色谱指纹图谱的建立方法，包括制备供试品溶液、制备对照品溶液、高效液相色谱分析、测定等步骤。本发明具有操作简单、稳定、灵敏、准确度高、重复性好等优点，能从色谱的整体特征面貌上较全面的反映明日叶的成分，准确地评价明日叶药材的质量，可较全面地对明日叶的内在质量进行控制与评价，监控明日叶药材的质量及鉴别真伪，确保药材的真实、安全、有效、稳定和一致性，为进一步开发、制定其中药材标准提供参考依据，规范、保障临床用药。

技术领域

本发明属于中药材指纹图谱的构建方法的领域，具体涉及一种明日叶高效液相色谱指纹图谱的建立方法。

背景技术

中药虽然已经有几千年的应用发展历史，但如何有效的评价中药材质量的真伪、优劣，一直是中药材研究与应用的重点和难点。随着科技的发展，指纹图谱质控技术在中药领域被提出并得到广泛认可，其在中药材质控中的应用也越来越多；中药材指纹图谱是指中药材经过适当处理后，采用一定的分析手段和检测仪器得到的，能够标示该中药材特性的图谱，它是现阶段可以较全面地反映中药材内在质量的最有效的手段之一，也得到了国际社会的认可。

明日叶 (AngelicakeiskeiKoidzumi) ，为伞形科当归属草本植物，原产于日本八丈岛，因今日摘叶，明天又长新芽因此而得名；现明日叶种植主要分布于广西、云南、贵州及台湾等南方地区；主要成分含有黄酮类、香豆素类、萜烯类等，具有抗衰老、抗溃疡、抗血栓、抗癌；降血压、降血脂、降血糖、降胆固醇；改善睡眠、改善视力等作用。近年来学者对明日叶的化学成分、提取分离与纯化，药理活性，明日叶的价值与开发等进行研究。中药指纹图谱能对中药材较复杂化学成分进行分类进行全面的分析；HPLC指纹图谱简便准确、灵敏度高、重复性好、检测种类多、分析快速是目前应用较为广泛的方法。目前关于明日叶的指纹图谱研究较少，历年的《中国药典》均未见收载，缺少对体现整体特性的研究，缺乏全面地控制药材质量的方法，从化学物质基础角度保证中药制剂的稳定性和可靠性，因此建立明日叶指纹图谱，对明日叶的质量评价具有非常重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于：针对上述存在的不足，提供一种明日叶高效液相色谱指纹图谱的建立方法，该方法具有操作简单、稳定、灵敏、准确度高、重复性好等优点，能从色谱的整体特征面貌上较全面的反映明日叶的成分，为明日叶质量控制提供了新的科学方法，弥补了现有质量控制技术的不足。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种明日叶高效液相色谱指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：

S1：制备供试品溶液：称取明日叶样品制成供试品溶液，备用；

S2：制备对照品溶液：分别称取绿原酸对照品和木犀草苷对照品，分别制成绿原酸对照品溶液、木犀草苷对照品溶液和混合对照品溶液，备用；

S3：高效液相色谱分析：将供试品溶液注入高效液相色谱仪中，在高效液相色谱检测条件下进行分析，将得到的高效液相色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统分析，得到明日叶的指纹图谱；所述高效液相色谱检测条件如下：采用ULtimate XB-C8色谱柱；以流动相A为甲醇，流动相B为0.1～0.3%甲酸为流动相进行梯度洗脱，柱温25～35℃，流速0.8～1.2mL/min，检测波长190～400nm，分析时间35min，进样量10μL，洗脱梯度程序：0～20min时，流动相A:流动相B＝5:95～40:60；20～40min，流动相A:流动相B＝40:60～48:52；40～45min，流动相A:流动相B＝48:52～5:95；